Рубрика

Имбирь от выпадения волос: Имбирь для волос — маски из масла и сока имбиря для роста и против выпадения волос

Содержание

Овощи Корень имбиря свежий - «ОТ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС!!!! Супер-альтернатива луку и перцовке!!!!»

Девочки и мальчики!!
Всем наверно уже давно известны луковый сок и перца жгучего настойка) Так вот..
Выпадают у меня волосы(( жуть((( алопеция((((
поэтому я вся в поисках магических средств простив выпадения. Обо всем не буду))) буду про имбирь)
Втирание лукового сока. ОЧЕНЬ действенная штука!! НО!!!!! Реально ацкий запах((( на всю квартиру. но это полбеды((( Лчно от меня несет пардон за км(( А если не втирать каждый день первый месяц, то эффект какбэ нулевой. Плюс реальный дискомфорт во время добычи этого самого сока.
Перцовка. Нууу... местнораздражающее ср-во. и на этом все. Не не спорю, польза от разгона крове- это гуд. но маловатобудет)
поэтому СОК КОРНЯ ИМБИРЯ!!!! Ребятыыыы, это класс!!! Это два в одном вышеперечисленных средств!! Просто кидаю в соковыжималку обыкновенную) и втрираю это супернереально полезное чудо!!! Тут тебе и кровоток.. и все возможные полезности))
Для волос, а вернее КОЖИ головы и ФОЛЛИКУЛОВ в соке имбиря вот что:
Активизируется приток крови, имбирь для волос способствует улучшенному питанию волосяных луковиц, что благотворно сказывается на структуре волос и ускоряет их рост.

Он полезен для волос, прежде всего из-за содержания витаминов, которые входят в его состав – А, С, В1, В2 и многие другие. К тому же имбирь богат солями магния, натрием, кальцием, фосфором, железом, а содержание в нем эфирных масел доходит до 3%. Эти масла являются прекрасным стимулятором роста волос, очищают жирную кожу головы, улучшают обменные процессы клеток.
Собственно рецепты) я делаю так:
Выжимаю сок. И шприцем по проборам. легкий массаж 5 минут. ПЛЕНКА!!! Сок реально быстро сохнет, а значит перестает действовать. Хожу сколько не лень, но не менеее 15 минут. Потом все обычные процедуры с волосами.
Когда реально есть время, то.. СУПЕР МАСКА!!! Выжимаю сок. Заливаю им (соком)молотый имбирь (во всех отделах приправ есть, но я на рыночке на развес беру). Размешиваем до состояния кашицы, кому как удобно наносить- такую густоту и делайте. Все это дело втираем массажными движениями. Далее ПЛЕНКА.+ шапка теплая зимняя. И ходим МИНИМУМ ЧАС. Затем опять же обычные процедуры) последний этап- ополаскивание любым травяным отваром, смесью трав, как угодно)) и не смываем травку с волос. Можно на корни нанести любую несмывалку, которая Вам помогает, типа витаминных спреев и так далее.. А можно ничего и не наносить) Отвар бывает полезнее всякой покупной шняжки)

Немного о массажном нанесении)) Народ, большинство из нас это делает неправильно!!!( не надо ничего растирать и все такое. так мы реально травмируем луковицы(( надо делать так (рассказал в Керале аювердический массажист) надавливаем подушечками пальцев на кожу головы. фиксируем их (так что бы волосы под пальцами не елозили) и не ослабляя нажима круговыми движениями (да, радиус не большой получается) сдвигаем кожу. И так по всей голове. И ТОЛЬКО ТАК будет польза. Даже при нанесении средств (жидких, гелевых, кремовых.. не важно) надо делать именно так. Может показаться, что это не айс для распределения ср-ва по всей коже, но это не так! Доверьтесь мудрости веков) кровь сама разнесет все полезности)) Удачи Вам)

Маска Biofollica с имбирем против выпадения и для роста волос

Китайская имбирная термо-маска против выпадения и ускорения роста волос. Формула с органическим экстрактом корня имбиря и женьшеня.

Маска на 70% состоит из органического экстракта корня имбиря, богатого растительным белком, а также всеми необходимыми витаминами (А, B1, B2, B3, B4, B5, B6, B9, С, E, К), макро и микроэлементами, фосфором, цинком, аминокислотой кератина, коллагеном, эфирным маслом). Эффект достигается усилением кровообращения и, как следствие, улучшением питания и стимуляции волосяных фолликулов за счет активного компонента имбиря – гингерола (Gingerol-6), провоцирующего тепло и лёгкое жжение.

Такая подборка сильнейших натуральных ингредиентов питает, восстанавливает и укрепляет волосяные фолликулы, предотвращая выпадение волос. Стимулирует кровообращение волосистой части головы, способствует росту здоровых волос, улучшает и ускоряет регенерацию. Оказывает антибактериальное действие, устраняя перхоть, воспаление, раздражение и зуд.

Преимущества использования

  • Укрепляет и увеличивает жизнеспособность фолликул.
  • Обеспечивает рост здоровых волос.
  • Нормализует работу сальных желез.
  • Оказывает антибактериальное действие, устраняя перхоть, воспаление, раздражение и зуд.
  • Облегчает расчесывание, устраняет ломкость, препятствует спутыванию.

Способ применения

Промыть волосы шампунем, нанести маску массирующими движениями втирая в кожу головы в течение 5 минут. Наденьте термо-колпак (для салонов красоты) или полиэтиленовую шапочку и оберните голову полотенцем (для домашнего использования). Через 15-30 минут обильно смойте водой. Рекомендуется проводить процедуру 1-2 раза в неделю, в течение 3-х месяцев. Для проведения 1 процедуры требуется 30-50 грамм маски. Одной упаковки хватит на полный курс.

Доступные варианты для покупки:

  • 500 мл – артикул 8862

польза, маски, осветление, ополаскивание, противопоказания

Многие не знают, что имбирный корень издавна используют не только в кулинарии, но и в косметологии. И в том числе, с его помощью можно укрепить волосы, вернуть им силу и блеск. Особенно популярны всевозможные маски с имбирём.

Давайте выясним, в чём польза этого экзотического растения и как оно используется для волос.

Состав и полезные свойства имбиря

Ароматический корень родом из тёплых стран. Это многолетнее растение относится к классу имбирных. Его наименование переводится дословно как «оленьи рога». Внешняя оболочка кремового цвета, но если её разрезать, то можно увидеть светло-жёлтую сочную мякоть. Вкус у растения очень специфический, поэтому перед употреблением в пищу имбирь требует предварительной обработки.

Польза корня для организма в его богатом составе, который содержит все витамины групп B, C и E. Кроме того, присутствуют и другие компоненты:

  • магний;
  • кальций;
  • железо;
  • натрий;
  • медь;
  • марганец;
  • цинк;
  • фосфор;
  • эфирные масла.

В целом имбирный корень полезен не только в период болезни и простуды. Его употребляют для борьбы с мигренью, в качестве очищающего, противомикробного, бактерицидного средства.

В чём польза для волос

Богатый состав имбиря полезен и для волос. Косметологи утверждают, что процедуры с его применением помогут вернуть им силу и блеск. Пряди получают необходимое питание, на них образуется невидимая плёнка, которая защищает от повреждений. Кроме того, на клеточном уровне происходит восстановление структуры, прекращается выпадение, кончики меньше секутся.

Корень имбиря используют для роста волос и борьбы с перхотью.

10 полезных свойств имбиря

Маски для волос в составе с имбирём

В чистом виде растение может вызвать зуд и покраснение кожи головы.

Чтобы получить положительный эффект, стоит прислушаться к советам специалистов и учесть все их рекомендации.

  1. Состав быстро теряет полезные свойства, его используют сразу после приготовления.
  2. Перед нанесением убедитесь, что нет аллергии на компоненты.
  3. Маски делают на грязные волосы, предварительно мыть их шампунем не нужно.
  4. Во время процедуры голову дополнительно утепляют махровым полотенцем.
  5. Один сеанс должен длиться не более 15 мин, иначе покраснения кожи головы не избежать.

Судить об эффективности имбирных масок для волос можно через несколько процедур. Однако для сохранения результата потребуется пройти лечебный курс. При необходимости сеансы повторяют.

Укрепляющая маска

Этот состав для волос готовится из свежего имбирного сока. Он оказывает положительное влияние на кожу головы, стимулирует кровообращение, укрепляет волосяные фолликулы.

Рецепт, следующий:

  • свежий имбирь;
  • желток.

Корень очистить, измельчить. Из кашицы отжать сок, смешать с желтком. Состав нанести на кожу головы, втереть в корни, держать не менее 60 мин, а после тщательно смыть.

Это средство эффективно при первой стадии облысения, выпадении волос в результате гормонального сбоя. Косметологи рекомендуют её женщинам, у которых они сухие и тонкие. Полный курс — 10–15 сеансов, затем нужен перерыв. В качестве профилактики состав наносят в холодное время года.

Маска для стимуляции роста

Следующая смесь воздействует на спящие волосяные фолликулы, тем самым активирует рост волос, улучшает приток свежей крови к коже головы.

Рецепт:

  • свежий имбирь;
  • растительное масло — 25 мл.

Корень очистить, измельчить, смешать с маслом. Состав нанести в прикорневую зону, хорошо втереть, оставшуюся смесь распределить по всей длине. Выдержать четверть часа, а затем тщательно смыть.

Маску из имбиря для роста волос наносят несколько раз в неделю. Используют любое растительное масло. Косметологи для этой цели советуют жожоба, касторку или репейное. Они хорошо сочетаются с основным компонентом, дополняют состав полезными элементами. Курс оздоровления волос включает 15–20 процедур.

Маска с имбирем для роста волос

Маска для быстрого роста из корицы и свежего имбиря

Состав улучшает кровоток, стимулирует рост волос, дополнительно питает их.

Рецепт:

  • пюре из имбиря — 25 г;
  • сок грейпфрута — одна рюмка;
  • молотая корица — 25 г;
  • миндальное масло — 5 капель.

Смешать все ингредиенты. Хорошо обработать корни и пряди. Время выдержки — 25 мин. Повторять каждые 5 дней на протяжении месяца.

Имбирная маска для склонных к жирности волос

Состав контролирует выработку подкожного жира. При регулярном нанесении волосы меньше пачкаются, приобретают здоровый вид.

Рецепт:

  • имбирь;
  • кунжутное масло — 25 мл.

Основной ингредиент подготовить, измельчить и смешать с маслом, чтобы получилась нежидкая масса. Равномерно распределить состав по длине, особое внимание уделяя корням. Выдержать 30 мин.

Имбирную маску для жирных волос в домашних условиях готовят каждые 7 дней. Для достижения необходимого эффекта проводят курс лечения из 5–8 сеансов.

Если волосы длинные, то кунжутного масла потребуется больше. Главное, следите за консистенцией готовой смеси. По густоте она должна быть похожа на сметану.

Маска из имбиря и горчицы для склонных к жирности волос

Состав не только борется с излишней выработкой подкожного жира, но и стимулирует активный рост волос. Чтобы приготовить средство, все компоненты предварительно измельчают, используют в равных пропорциях, например, по 25 г.

Рецепт, следующий:

  • корень лопуха;
  • почки берёзы;
  • листья крапивы;
  • шишки хмеля;
  • горчичный порошок;
  • тёртый имбирь.

Все компоненты смешать, развести тёплой водой до кашеобразного состояния. Нанести и держать до лёгкого жжения. Процедуру повторить через 7 дней.

Маска для смешанного типа волос

Если волосы у корней жирные и сухие на кончиках, то они относятся к смешанному типу. Ухаживать за такими сложнее, требуется специальный подход. Эта маска с имбирным корнем для комбинированных волос восстанавливает их по всей длине, увлажняет концы, но немного подсушивает у основания. Наносят её поэтапно.

Состав, следующий:

  • сухой имбирь — 5 г;
  • один желток;
  • лимонный сок — 10 капель;
  • мёд — 25 г.

Имбирь смешивают с желтком, добавляют лимонный сок. Половину массы наносят в область корней, втирают. В остаток смеси вливают мёд, хорошо перемешивают, распределяют по всей длине. Держать маску необходимо 20–25 минут, повторять каждые 10 дней.

Маска для сухих волос

Состав питает сухие волосы, увлажняет их, склеивает секущиеся концы. Косметологи рекомендуют наносить его каждые 5–7 дней, курсом по 10 процедур. Затем на два месяца сделать перерыв, при необходимости сеансы повторяют.

Рецепт:

  • свежий корень имбиря;
  • кефир жирный — 75 мл;
  • жидкий мёд — 5 г;
  • сок лимона — 15 капель.

Имбирь подготовить, натереть на тёрке, чтобы получилась кашица. Для маски его использовать 1 ст. л. Смешать с остальными ингредиентами. Распределить состав по длине.

Маска для волос из имбиря и мёда также ухаживает за сухой кожей головы. Подходит для применения в любое время года. Однако женщинам с тёмным цветом волос надо быть аккуратнее, так как состав может сделать их более тусклыми.

Увлажняющая маска из имбиря и ржаного хлеба для сухих волос

Состав рекомендован для восстановления ослабленных, тусклых, сухих и ломких волос.

Рецепт:

  • кашица из имбиря — 25 г;
  • кипячёная вода — 25 мл;
  • ржаной хлеб — 2–3 корочки;
  • жидкий мёд — 30 г;
  • масло амлы — 5 г.

Хлеб размочить в воде, оставить на 30 минут, а после добавить остальные компоненты. Готовый состав получается густым, хорошо держится. Маску равномерно нанести по всей длине прядей, свернуть их на макушке, утеплить. Выждать полчаса. Сеансы повторять каждые 14 дней.

Маска от выпадения волос

Чтобы приготовить эту маску, используют сок из свежего имбиря. Для этого корень необходимо измельчить, а после сцедить жидкость.

Состав:

  • имбирный сок — 50 мл;
  • перепелиные яйца — 2 шт.;
  • кофейная гуща — 25 г;
  • мёд — 20 г.

Смешать ингредиенты, добавить к ним яйца. Состав нанести по всей длине, равномерно распределить, хорошо втереть в корни и кожу головы. Оставить на 20 минут, а затем тщательно смыть.

Такая маска из имбиря активизирует спящие луковицы, возвращает прядям объём, здоровый блеск и силу, борется с выпадением волос. Результат заметен после 5 сеансов, но для полного выздоровления потребуется пройти полный лечебный курс, который состоит из 10–15 процедур. Повторять сеансы каждые 10 дней.

Маска с алоэ и корнем имбиря для тусклых и ослабленных волос

Следующий состав способен оживить слабые волосы, придать им блеск, восстановить структуру. Косметологи советуют наносить такую маску тем женщинам, кто постоянно пользуется феном, утюжком, подвергает пряди окрашиванию, завивке и другому агрессивному влиянию.

Рецепт:

  • кашица имбиря — 25 г;
  • репейное или касторовое масло — 5 мл;
  • сок алоэ — 25 мл;
  • перепелиное яйцо;
  • мёд — 1 ч. л.

Масло подогреть на паровой бане до комнатной температуры, смешать с остальными компонентами. Маску равномерно распределить, выдержать 20 минут, а после смыть. Чтобы получить эффект необходимо провести курс из 10–15 процедур. Наносить состав необходимо каждую неделю, но не чаще двух раз.

Оздоравливающая маска

Смесь готовится из имбирного сока, которую втирают только в корни. Маска подходит для всех женщин, которые хотят оздоровить свои волосы, вернуть им блеск и природную красоту. А также она помогает справиться с проблемой выпадения и ломкости, оздоравливает и питает.

Рецепт:

  • сок имбиря — 25 мл;
  • коньяк — 1 ст. л.;
  • розмариновое масло — 4 капли;
  • репейное масло — 50 мл.

Масла подогреть до комнатной температуры на паровой бане, смешать с другими компонентами. Ватным тампоном быстро нанести маску в область корней, хорошо втереть. Оставить на четверть часа, после тщательно смыть. Процедуру повторять пару раз в 7 дней, курс — 10 сеансов.

Чтобы получить двойной эффект от маски, на кончики наносят разогретое репейное масло. Оно их склеивает и увлажняет сухие пряди.

Маска-ополаскиватель от перхоти

Для приготовления состава используют порошок имбиря. Он более жгучий, чем свежий корень, поэтому добавляют около 20 г. Маска для волос из имбирного порошка подходит для частого использования, хорошо борется с перхотью и шелушением кожи головы.

Из одной ложки порошка имбиря приготовить крепкий отвар, остудить до комнатной температуры и развести кипячёной водой в соотношении 1:4. Ополоснуть волосы раствором после мытья головы, дать ему полностью впитаться, а затем смыть.

Маска с имбирём для лечения мелкой перхоти

Состав эффективен при шелушении кожи головы, обильной перхоти.

Рецепт:

  • хна бесцветная — 75 г;
  • сухой имбирь — 25 г;
  • масло оливы — 5 мл.

Хну заварить в горячей воде, а после добавить имбирный порошок и масло. Состав наносить на кожу головы, хорошо втирая. Выдержать не менее 1 ч., а затем тщательно смыть шампунем. Повторить процедуру необходимо несколько раз в неделю.

Восстанавливающая маска с имбирём и эфирными маслами

Состав наносят на хорошо вымытые и высушенные пряди, а после тщательно смывают шампунем. Для восстановления волос используют эфирное масло имбиря, которое продаётся к любой аптеке. В качестве основы берут оливковое или другое растительное масло.

Рецепт:

  • растительное масло — 50 мл;
  • ромашковый эфир — 4 капли;
  • эфир апельсина — 2 капли;
  • эфир имбирного корня — 2 капли.

Основу слегка нагреть на паровой бане, добавить эфиры. Ватным тампоном быстро нанести состав на кожу головы, втереть в корни. Держать не более 15 мин. Процедуру повторять раз в 10 дней.

Маска из имбиря и овсянки

Состав восстанавливает волосы на клеточном уровне, питает их и стимулирует рост.

Рецепт:

  • простокваша — 150 г;
  • имбирный сок — 5 мл;
  • овсяная мука — 50 г.

Из хлопьев приготовить муку, залить простоквашей, оставить на 1 час, а затем в смесь добавить имбирный сок. Быстро нанести на волосы, уделяя особое внимание корням. Выдержать 15 минут. Сеанс повторять каждую неделю.

Осветление волос при помощи имбиря

Имбирь способствует не только оздоровлению волос, но и осветлению. Уже за 3 процедуры можно получить необходимый оттенок прядей и не навредить им.

Для осветления прядей нужно приготовить имбирный настой. Для этого корень натереть на тёрке, отмерить 100 г кашицы. Вскипятить стакан воды, залить имбирь и настаивать 1 час. Готовый раствор нанести на сухие вымытые волосы, выдержать 40 минут. Процедуру повторять каждую неделю, пока не добьётесь необходимого результата.

Ополаскиватель из имбиря

Такой домашний кондиционер подходит для жирных волос. Он тормозит работу сальных желёз, убирает перхоть. Ополаскивать пряди нужно регулярно, после каждого мытья.

Состав:

  • лимон — 1 шт.;
  • имбирное пюре — 50 г.

Из цитруса выдавить сок, смешать с тёртым имбирём. Кондиционер хранить в холодильнике. Перед нанесением развести тёплой водой до жидкого состояния.

Противопоказания

Имбирный корень содержит массу активных компонентов, которые помимо пользы могут нанести и вред.

Стоит воздержаться от процедур:

  • если у вас чувствительная кожа головы;
  • аллергия на продукт.

Чтобы проверить реакцию организма, прежде чем наносить состав на волосы, попробуйте его на изгибе локтя. Если через 10 минут кожа не покраснеет, значит, аллергии нет.

Имбирь приносит огромную пользу для волос и заслуживает внимания как эффективное косметическое средство. С помощью него можно восстановить повреждённые волосы, вернуть им объём, здоровье и силу. Разнообразные рецепты масок помогут быстро справиться с проблемой, тем более что для их приготовления не нужны особые компоненты, а эффект от процедур заметен уже через несколько сеансов.

Имбирные маски для разного типа волос

Вы знали, что имбирь - идеальное средство против выпадения волос?

Имбирь укрепляет волосы, предотвращает их выпадение, а еще эффективно борется с перхотью.

Последнее обновление: 26 марта, 2019

Имбирь – чудесное растение. Немногие специи столь же полезны для организма (и для здоровья, и для косметических целей) и обладают таким количеством терапевтических свойств, как он. Имбирь пришел к нам из Китая. Там это традиционное лекарственное растение славится своими полезными свойствами уже на протяжении многих столетий. Имбирь необычайно богат эфирными маслами, аминокислотами, антиоксидантами, витаминами и минеральными веществами, кроме того, он станет просто идеальным средством против выпадения волос и для стимуляции их роста.

Читайте также: Невероятно красивые волосы: делимся 5 рецептами с розмарином!

Полезные свойства имбиря

Полезные свойства имбиря известны людям уже с глубокой древности. Природное богатство веществ, входящих в состав имбиря, делает его идеальным средством для:

  • Уменьшения ревматических и менструальных болей;
  • Лечения гриппа и других простудных заболеваний;
  • Улучшения работы сердечной мышцы и помощи при сердечно-сосудистых заболеваниях;
  • Борьбы с депрессией и подавленностью;
  • Снижения уровня стресса;
  • Улучшения пищеварения.

Как же действует имбирь против выпадения волос?

Что же касается свойств имбиря относительно предотвращения выпадения волос и стимуляции их роста, то можно отметить следующее:

  • Имбирь обладает превосходными возможностями для улучшения кровообращения и притока крови к коже головы, что оказывает стимулирующее действие на волосяные фолликулы и таким образом способствует росту волос. Жирные кислоты, которые также входят в состав корня имбиря, отлично подойдут для тонких и ослабленных волос. Они восстановят их структуру и вернут красоту и мягкость.
  • Как известно, перхоть также является одной из причин выпадения волос. И мы тратим существенные суммы денег на различные средства, препятствующие ее появлению. Однако, многие из покупных средств не дают никакого эффекта. Кроме того, они могут вызвать раздражение, так как содержат химические элементы.
  • Имбирь же, напротив, является превосходным средством от перхоти и, главное, абсолютно натуральным. Поэтому если вы страдаете от перхоти, то попробуйте имбирь, его природные антисептические свойства действительно дают прекрасный результат.

Как приготовить маску для волос на основе имбиря?

Данное средство для волос на основе имбиря нужно использовать через день в течение месяца. Его эффективность будет значительно выше, если вы найдете время, чтобы при нанесении делать себе массаж головы. Процедура продолжительностью 15 минут поможет смеси лучше впитаться в кожу головы и волосяные фолликулы. Давайте посмотрим, как его правильно готовить и какие ингредиенты для этого понадобятся.

Ингредиенты:
  • 1 столовая ложка тертого имбиря
  • 1 столовая ложка масла жожоба (или оливкового масла)
Способ приготовления:
  • На самом деле все очень просто. Сначала нужно потереть корень имбиря на терке, чтобы получилось нужное количество (полная столовая ложка).
  • Далее готовим столовую ложку масла жожоба. Его можно купить в любой аптеке, но если у вас его все-таки не окажется под рукой, то подойдет и обычное оливковое масло.
  • Кладем оба ингредиента в одну емкость и хорошо перемешиваем до получения вязкой массы однородной консистенции. У нее будет очень приятный, характерный запах (благодаря наличию имбиря).
  • Теперь можно наносить (на влажные волосы). Очень важно втирать в кожу головы энергичными круговыми движениями, только так можно стимулировать кровообращение. Делать это желательно в течение 15 минут для достижения желаемого эффекта.
  • Постепенно вы начнете ощущать тепло. Это знак того, что имбирь начинает действовать. Оставьте маску на волосах еще на 5 минут, прежде чем смывать ее. По истечении этого времени промойте волосы теплой водой (не слишком горячей, так как это вредит волосам).

Это интересно: Маска из банана и пива: сильные и красивые волосы уже после первой недели применения!

Теперь вы знаете об этом простом, но очень эффективном средстве против выпадения волос на основе имбиря. Следует отметить, что оно будет полезно не только при проблеме потери волос. Имбирь помогает укрепить и восстановить поврежденные волосы, а также предотвратить появление перхоти. При регулярном использовании (через день) вы скоро заметите положительный результат.

Это может вас заинтересовать ...

 

Шампунь против выпадения волос GINGER PURIFYING SHAMPOO с экстрактом имбиря от ESTHETIC HOUSE

Шампунь на основе экстракта имбиря и масла имбиря успокаивает кожу головы, снимает воспаление, регулирует работу сальных желез, уменьшает жирность, а природных антибиотиков (фитонцидов) и антиоксидантов, предупреждает появление перхоти, улучшает и укрепляет структуру волос.

 

 

Экстракт имбиря не только питает волосы и кожу головы необходимыми витаминами и микроэлементами, а также обогащает аминокислотами, стимулирует активный рост красивых и здоровых волос.

 

 

Шампунь с мягкой моющей формулой на ПАВах растительного происхождения, получаемых при переработке кокосового масла, имеет нейтральный pH, поэтому не сушит кожу головы и не оставляет эффекта стянутости после мытья.

 

 

Идеален в качестве основного ухода для поврежденных и ломких волос, склонных к выпадению, а также в качестве профилактики появления перхоти.

 

 

Консистенция шампуня кремовая, из-за натурального происхождения моющих компонентов,  пенится не сильно, но это не уменьшает его моющей способности, он хорошо очищает кожу от загрязнений и себума, при этом полностью безопасен для кожи и волос.

 

 

 

В составе серии 2 средства – шампунь и кондиционер.

 

Их совместное применение обеспечивает полноценный уход за волосами и кожей головы, позволит восстановить поврежденные и сухие волосы, снизить жирность кожи, защитить волосы от ломкости и повреждения, предупредит выпадение волос и появление перхоти.

 

 

 

Основные компоненты:

 

 

- Масло корня Имбиря – стимулирует рост волос, оказывает на кожу антиоксидантное действие, устраняет перхоть и зуд, придает блеск волосам, уменьшает жирность кожи головы.

 

- Экстракт корня Имбиря – питает витаминами группы B, PP, С, кальцием, цинком, железом и др., укрепляет структуру волоса, придает насыщенный блеск, профилактирует образование перхоти.

 

- Экстракт Меда – дарит сияние, питает витаминами и микроэлементами для здоровья и блеска волос.

 

- Экстракт Прополиса – укрепляет волосы, питает их аминокислотами, маслами, и витаминами, повышает упругость и эластичность, стимулирует рост волос.

 

- Маточное молочко - омолаживает структуру волоса, защищает от появления седины и от негативного воздействия отгружающей среды, успокаивает кожу, предотвращает образование перхоти.

 

- Масло Арганы – питает волосы, увлажняет локоны по всей длине, предотвращает их ломкость, укрепляет корни, стимулирует рост.

 

- Масло Оливы - увлажняет кожу головы, укрепляет корни волос, профилакатирует появление перхоти, питает и укрепляет волосы, предупреждает появление секущихся кончиков.

 

- Экстракт масла Жожоба – оказывает на кожу головы оздоравливающее, увлажняющее действие, способствует устранению перхоти, защищает волосы от выпадения, восстанавливает после завивки или укладки.

 

- Пироктон оламин – бактерицидный компонент, угнетает грибок, уменьшает образование перхоти, зуда и раздражения на коже.

 

- Аллантоин – антиоксидант, снимает воспаление, оказывает кондиционирующее действие на волосы.

 

 

Способ применения:

 

 

 

Нанесите небольшое количество шампуня на влажные волосы, массажными движениями добейтесь появления пены, а после смойте тщательно водой.

 

 

Disaar масло для волос для роста и против выпадения золото с имбирем 30 гр

Описание

Disaar Oil» – это растительная сыворотка для роста и укрепления волос. Благодаря своим компонентам она восстанавливает питание клеток кожи, обеспечивает волосы полезными элементами и нормализует работу сальных желез. С «Disaar Oil» волосы становятся длиннее на 2-5 см за 4 недели, набираются сил, блеска и красоты. Кроме того, сыворотка пробуждает спящие фолликулы, поэтому уже через месяц регулярного использования препарата вы заметите множество новых коротких волосков, а через 2-3 месяца волосы станут заметно гуще.
Несмотря на натуральный состав, «Disaar Oil» дает заметный эффект. Ее можно использовать людям с тонкими и ломкими волосами или обладателям очень длинных волос, которым не хватает ухода. Также она полезна при тех видах облысения, когда волосяные фолликулы перестали выполнять свои функции и рост волос замедлился или прекратился вовсе. Сыворотка очень экономична. На одну процедуру необходимо всего несколько капель продукта, а значит, флакончика Andrea хватит на 1-2 месяца.
Действие:
«Disaar Oil» содержит в своем составе корень имбиря, который мягко, но эффективно стимулирует рост волос. Компоненты растения пробуждают спящие фолликулы, и всего за 1-2 месяца использования сыворотки на коже появляются новые волоски. Причем в отличие от средств, которые нужно принимать внутрь, волосы растут только в месте нанесения «Disaar Oil», беспокоиться о появлении нежелательной «растительности» на теле не нужно.
Женьшень в составе средства в первую очередь поддерживает кожу головы. Экстракт этого растения дает клеткам необходимое питание, укрепляет волосяные луковицы, избавляет кожу головы от зуда и перхоти. Китайский рунический цветок, известный омолаживающими свойствами, продлевает жизнь фолликулов, поэтому волосы меньше выпадают и становятся гуще. А масло виноградных косточек придает волосам естественный блеск, делает их послушными и ухоженными.
Способ применения:
Нанесите несколько капель продукта на корни волос перед мытьем. Помассируйте, распределите по коже и закутайте голову. Подержите некоторое время и смойте теплой водой. Процедуру лучше проводить 1-2 раза в неделю.
Также возможно добавить 3 мл в шампунь (100 мл) и помыть голову этой смесью. В этом случае шампунь нужно нанести на волосы, вспенить и помассировать кожу головы 5 минут.
Состав: корень имбиря, женьшень, вода, китайский рунический цветок, масло виноградных косточек.
Внимание!
После вскрытия флакона сыворотку необходимо использовать в течение 4 месяцев.
Не храните смесь из шампуня и сыворотки, добавляйте «Disaar Oil» в порцию шампуня непосредственно перед использованием.

Только зарегистрированные клиенты, купившие этот товар, могут публиковать отзывы.

Шампунь 101 против выпадения волос с имбирем

Шампунь 101 против выпадения волос с имбирем

Шампунь серии 101 от облысения с имбирем активно питает волосы и укрепляет корни волос, что способствует профилактике облысения. Активирует рост волос и регулирует выделение кожного жира. А также активирует клетки роста волос, стимулирует кровообращение кожи головы, пробуждая многочисленные новые волосяные луковицы.

Состав: имбирь, многоцветковый горец, тиан чи, черный сезам и многочисленные экстракты китайских трав.

Имбирь ― целебное растение богатое  химическими составами, насчитывающими более четырех сотен соединений.  Имбирь содержит  эфирные масла, аскорбиновую кислоту,  витамин А , В, натрий, калий, фосфор, железо, цинк соли магния, а также ценнейшие аминокислоты, среди которых лейзин, триптофан, фениланин, треонин, метионин, валин.

Компоненты, содержащиеся в имбире:

  • витамины А, В2, В1, С,
  • соли магния, кальций, фосфор, железо, натрий, цинк, калий
  • эфирные масла

Несомненно, что все перечисленные витамины и полезные микроэлементы будут активно стимулировать рост волос и придавать им здоровый и цветущий вид. Не менее полезными являются и содержащиеся в корне имбиря эфирные масла, которые очищают жирную кожу и стимулируют кровообращение. Имбирь отлично действует  кожу головы, не раздражает, не высушивает.Считается, что содержащиеся в имбире вещества благоприятно влияют как на сами волосы, так и на луковицу волос . 

Горец ―  широко распространенное однолетнее травянистое растение, часто является сорняком. Содержит флавонолы, кварцетин и его многочисленные производные. В корнях содержаться дубильные вещества, витамины K и C. Горец обладает кровоостанавливающим действием, болеутоляющим эффектом. Жидкий экстракт из этого растения содержит авикулярин и другие флавонолы. Присутствие в траве водорастворимой кремниевой кислоты позволяет применять экстракт для укрепления легочной ткани. Препараты из горца оказывают нежное слабительное действие. Кашица из горца в народной медицине издавна применяется для заживления ран. 

Способ применения:  возьмите необходимое количество шампуня, нанесите на мокрые волосы, тщательно, легкими движениями помассируйте не менее 3 минут, чтобы активные вещества подействовали и смойте водой. Эффект заметен уже после 7 дней применения.

Рекомендуем: после мытья волос шампунем, для закрепления результата, использовать бальзам этой же серии.

Купить "Шампунь 101 против выпадения волос с имбирем" в Алматы с доставкой Вы можете в нашем интернет-магазине "Здоровая жизнь". Доставка  "Шампунь 101 против выпадения волос с имбирем" в Астану. Заказать "Шампунь 101 против выпадения волос с имбирем" с доставкой в г. Караганда Вы можете в нашем интернет - магазине Fitolife.com.kz. Для оформления заказа свяжитесь с нами по телефонам +77074141124, +77076491820, +77279834270

6-Гингерол подавляет рост стержня волос в культивируемых фолликулах волос человека и модулирует рост волос у мышей

PLoS One. 2013; 8 (2): e57226.

, 1 , 2 , 3 , 1 , 1 , 1 и 1 , *

Юн Мяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Наньфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ябин Сан

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Вэньцзюнь Ван

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Benjun Du

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Шун-э Сяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ицзюэ Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Наньфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Чжици Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Наньфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Майкл Хэмблин, редактор

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

MGH, MMS, Соединенные Штаты Америки,

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Задумал и спроектировал эксперименты: ZH YM. Проведены эксперименты: YM YS SX. Проанализированы данные: WW BD. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: YH YS. Написал статью: Ю.М.

Поступила 28 июля 2012 г .; Принято 18 января 2013 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используется для сдерживания выпадения и стимуляции роста волос в Восточной Азии. Несколько компаний производят шампунь, содержащий экстракт имбиря, который, как утверждается, обладает свойствами против выпадения и стимулирования роста волос. Однако нет никаких научных доказательств, подтверждающих эти утверждения. Это исследование было предпринято для измерения 6-гингерола, основного активного компонента имбиря, на удлинение стержня волоса in vitro и рост волос in vivo , а также для изучения его влияния на клетки дермального сосочка человека (DPC) in vivo и in vitro. 6-Гингерол подавлял рост волос в волосяных фолликулах в культуре и пролиферацию культивированных DPC. Ингибирование роста DPC 6-гингеролом in vitro может отражать снижение отношения Bcl-2 / Bax. Аналогичные результаты были получены in vivo . Результаты этого исследования показали, что 6-гингерол не обладает способностью стимулировать рост волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического воздействия на DPC in vitro и может вызывать удлинение телогена. фаза in vivo .Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос.

Введение

Волосы - это защитный придаток на теле, который считается вспомогательной структурой покровов. Хотя нарушение и потеря волосяных фолликулов и изменения в производстве волосяных волокон у людей, как правило, не опасны для жизни, их глубокое влияние на социальные взаимодействия и психологическое благополучие пациентов неоспоримо [1], [2] что, в свою очередь, увеличивает требования к возможным вариантам лечения и превращает средства для лечения выпадения волос в индустрию с многомиллионным оборотом. Несмотря на это, большинство современных продуктов неэффективны, о чем свидетельствует тот факт, что FDA одобрило только два метода лечения выпадения волос [3]. Учитывая ограниченную, временную и несколько непредсказуемую эффективность одобренных в настоящее время лекарств от выпадения волос [3], необходимы новые фармакологические методы лечения и средства. Было много попыток найти материалы из традиционных лекарственных трав, которые предотвращают выпадение волос [4] - [8]. Например, зеленый чай, клубнеплодный цветок ( Polygonum multiflorum Thunb) и имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используются в Восточной Азии для лечения пациентов, страдающих облысением и выпадением волос.Несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт P. multiflorum или экстракты имбиря, которые, как утверждается, обладают свойствами против выпадения и стимулирования роста волос [9], [10]. Недавно несколько исследований показали, что зеленый чай [4] или экстракт P. multiflorum [8] могут способствовать росту волос; тем не менее, нет никаких научных доказательств, подтверждающих это утверждение об имбире.

Волосяной фолликул млекопитающих содержит дермальный сосочек (DP), который в основном состоит из DP-клеток (DPC), и дермальную оболочку, происходящую из мезенхимы, а также эпителиальные клетки наружной корневой оболочки, внутренней корневой оболочки, матрицы и стержня волоса происходит из эпителия [11].Постнатальный волосяной фолликул проходит цикл анагена (фаза роста), катагена (фаза регресса) и телогена (фаза покоя). Взаимные взаимодействия между эпителием и мезенхимой важны для послеродового роста волос и цикличности волосяных фолликулов. DP, как известно, играет ключевую роль в регуляции роста волос и цикличности [11]. Таким образом, любой фактор, который влияет на функции DPC, может влиять на рост волос. Например, миноксидил [12] и эпигаллокатехин-3-галлат [4] стимулируют рост волос, оказывая свое антиапоптотическое действие на DPC (за счет увеличения соотношения Bcl-2 / Bax), это один из механизмов воздействия на Миноксидил.С другой стороны, цисплатин [13] приводит к выпадению волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (за счет уменьшения отношения Bcl-2 / Bax).

В последнее время было проведено несколько научных исследований, направленных на выделение и идентификацию активных компонентов имбиря, а также на научную проверку его фармакологического действия и действия его составляющих [14], [15]. Результаты показывают, что 6-гингерол является наиболее распространенным активным компонентом и обладает различными фармакологическими и микробиологическими эффектами, включая противоопухолевое, противовоспалительное, антиоксидантное и противорвотное действие; Однако фармакологические эффекты 6-гингерола на рост волос научно не доказаны.

В этом исследовании мы исследовали эффекты 6-гингерола на человеческие DPC и рост волосяного стержня ex vivo и рост волос у мышей.

Материалы и методы

2.1. Выделение и культивирование волосяных фолликулов человека

Образцы пункционной биопсии (4 мм) были взяты с неболедых затылочных костей головы пациентов, перенесших операцию по трансплантации волос по поводу андрогенной алопеции. Медицинский этический комитет Южного медицинского университета одобрил все исследования, описанные здесь.Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией принципов, и от всех пациентов было получено информированное письменное согласие. Волосяные фолликулы выделяли и культивировали, как описано Philpott et al [16]. Вкратце, волосяные фолликулы выделяли щипцами под бинокулярным световым микроскопом и культивировали в 24-луночных чашках в течение 7 дней в среде Williams E (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) с добавлением 10 нг / мл гидрокортизона, 10 мг / мл инсулина 2. мМ L-глутамин, 100 Ед / мл стрептомицина и 10 нг / мл гидрокортизона при 37 ° C в атмосфере 5% (об. / об.) CO 2 .6-Гингерол (чистота> 95%; Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО; Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай) и для сохранения конечной концентрации носителя < 0,1%. 6-Гингерол добавляли в культуральную среду в концентрации 10 или 20 мкг / мл, и 0,1% (об. / Об.) ДМСО использовали в качестве контроля. Во всех экспериментах культуральную среду и 6-гингерол обновляли через день. Всего 180 анагенных волосяных фолликулов от 3 разных добровольцев (60 фолликулов / субъект) культивировали при каждом условии роста.Средняя длина волосяного фолликула от дна дермальных сосочков в нулевой день составляла 4,5 мм.

2.2. Культура человеческих DPC

DPC выделяли и культивировали, как описано Magerl et al [17]. Вкратце, кожные сосочки были микродиссектированы с луковиц рассеченных волосяных фолликулов, перенесены на пластиковые чашки и культивированы в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Gibco, Grand Island, NY) с добавлением 100 Ед / мл пенициллина, 100 мг / мл стрептомицина и 20 мг / мл. % (об. / об.) фетальной бычьей сыворотки (FBS; Gibco) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 .Эксплантаты выдерживали в среде в течение 7 дней, среду меняли каждые 3 дня. Когда рост клеток становился субконфлюэнтным, клетки собирали с 0,25% (мас. / Об.) Трипсин-ЭДТА (Invitrogen, Carlsbad, CA) и субкультивировали с соотношением деления 1: 3. После этого DPC поддерживали в DMEM с добавлением 10% FBS.

2.3 Анализы пролиферации клеток и апоптоза

Пролиферацию клеток определяли с помощью анализа МТТ, как описано Мосманном [18]. Вкратце, DPC (3 × 10 4 клеток / лунку) высевали в 96-луночные планшеты и инкубировали в течение 24 часов перед добавлением 6-гингерола в концентрации 5 или 10 мкг / мл, а затем инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов, используя 0.1% ДМСО в качестве отрицательного контроля. Поглощение при 490 нм измеряли с использованием ридера для ELISA. Относительную жизнеспособность клеток рассчитывали путем деления оптической плотности обработанных клеток на оптическую плотность необработанных клеток в каждом эксперименте.

DPC, высеянные в 6-луночные планшеты с плотностью 2,5 × 10 5 клеток / лунку обрабатывали 5 или 10 мкг / мл 6-гингерола или 0,1% ДМСО в качестве контроля в течение 48 часов. Апоптоз клеток исследовали с использованием набора для обнаружения аннексина V (Caltag-Medsystems Ltd., Buckingham, UK) в соответствии с инструкциями производителя.Сбор и анализ данных проводились на цитометре FACSort (FAC-SCA, New York, NY). Минимум 2,5 × 10 5 событий клеток было получено для каждой группы в процессе анализа, и каждый эксперимент повторяли не менее 3 раз.

2.4 Вестерн-блоттинг

И контрольные, и обработанные 6-гингеролом DPC собирали через 48 часов после обработки. Готовили полные клеточные лизаты и 30 мкг белка подвергали электрофорезу в додецилсульфате натрия / полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с последующим иммуноблот-анализом.Первичные антитела инкубировали при соответствующих разведениях: моноклональное антитело против Bcl-2, 1: 500; моноклональное антитело против Bax, 1: 500; и моноклональное антитело против GAPDH, 1: 1000 (Santa Cruz Biotechnology Inc., Санта-Крус, Калифорния). Иммунные комплексы детектировали с использованием набора для вестерн-блоттинга с усиленной хемилюминесценцией (ECL) (Santa Cruz) и количественно определяли с использованием программного обеспечения для денситометрии аналитик / ПК (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA).

2.5 Анализ 6-гингерола in vivo

Всего 36 самок мышей C57BL / 6 (возраст 8 недель) были приобретены в Центре экспериментальных животных Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай) и случайным образом разделены на 3 группы (12 /группа).Анаген был индуцирован депиляцией кожи на спине мышей C57BL / 6, которые находились в фазе телогена цикла, как описано [19]. Вкратце, волосы удаляли путем местного применения тиогликолата кальция. Со следующего дня (день 1) 0,2 мл 0,1 мг / мл или 1 мг / мл 6-гингерола в 75% (об. / Об.) Этаноле наносили на кожу спины каждого животного каждый день в течение 10 дней. Контрольные животные получали только раствор носителя. Каждые 5 дней после депиляции за спиной каждой мыши наблюдали и фотографировали.Все эксперименты длились 20 дней, после чего мышей умерщвляли. Гистологию образцов кожи, взятых со спины каждой мыши, исследовали с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (H&E). Все экспериментальные манипуляции проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Национальных институтов здравоохранения и с одобрения Комитета по этике экспериментальных животных Южного медицинского университета.

2.6 Статистический анализ

Все данные выражены как среднее ± стандартное отклонение от трех независимых экспериментов.Весь статистический анализ проводился с помощью SPSS 13.0. Различия между экспериментальными группами оценивали с помощью теста Стьюдента t . Статистически значимая разница была установлена ​​на уровне P <0,05.

Результаты

3.1 6-гингерол значительно подавляет рост DPC и индуцирует апоптоз клеток

Чтобы изучить влияние 6-гингерола на пролиферацию DPC, мы обрабатывали DPC ДМСО (контроль) или 6-гингеролом (5 или 10 мкг / мл). В течение 48 часов культивирования 6-гингерол проявлял значительный дозозависимый ингибирующий эффект на DPC ().Чтобы определить механизмы, лежащие в основе роста ингибированных 6-гингеролом DPC, влияние 6-гингерола на апоптоз клеток оценивали путем окрашивания флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) и аннексином V. Соответственно, воздействие 6-гингерола на DPC значительно увеличивало апоптоз клеток. по сравнению с контрольной группой, что позволяет предположить, что апоптоз является механизмом, лежащим в основе цитотоксичности, вызванной 6-гингеролом ().

Ингибирование роста и индукция эффектов апоптоза 6-гингерола на человеческие DPC. in vitro.

DPC культивировали с различными концентрациями 6-гингерола в течение 48 часов. По сравнению с контролем, обработанным носителем, обработка 10 мкг / мл 6-гингерола значительно ингибировала пролиферацию клеток. (А) Жизнеспособность клеток определяли с помощью анализа МТТ. * P <0,05 по сравнению с контролем, обработанным носителем. (B) Анализ клеток на апоптоз.

3.2 Влияние лечения 6-гингеролом на регуляторные белки апоптоза

Ранее было показано, что 6-гингерол вызывает апоптоз через путь гибели митохондрий [20] - [22].Поскольку известно, что этот путь апоптоза регулируется балансом анти- и проапоптотических белков семейства Bcl-2 [23], [24], мы исследовали уровень экспрессии двух ключевых белков семейства Bcl-2 Bcl. -2 и Bax в ответ на обработку DPC 6-гингеролом. Исследования иммуноблоттинга показывают, что 6-гингерол индуцировал значительное подавление антиапоптотического белка Bcl-2 и повышение проапоптотического белка Bax по сравнению с контролем, обработанным носителем. Кроме того, уровень белка Bax был повышен дозозависимым образом от 6-гингерола ( P <0.05) ().

Влияние 6-гингерола на экспрессию белков Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC.

(A) DPC обрабатывали указанными концентрациями 6-гингерола (0,1% ДМСО контроль) в течение 48 часов и подвергали вестерн-блоттингу. Показаны репрезентативные полосы. (B) Гистограммы, показывающие количественную оценку полос вестерн-блоттинга. GAPDH использовался в качестве внутреннего контроля. * P <0,05 по сравнению с контрольной (0,1% ДМСО) группой.

3,3 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса в культивируемых волосяных фолликулах человека

Поскольку DP играет ключевую роль в регуляции роста волос, мы исследовали влияние 6-гингерола на удлинение стержня волоса. Волосяные фолликулы кожи головы человека выделяли и культивировали как в отсутствие, так и в присутствии 6-гингерола. Мы наблюдали, что 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляют удлинение стержней волос (и).

Ингибирующий эффект 6-гингерола на удлинение стержней волос человека in vitro.

Волосяные фолликулы обрабатывали 6-гингеролом в различных концентрациях в течение 7 дней, а удлинение стержней человеческих волос измеряли с помощью калиброванной сетки окуляра в световом микроскопе при увеличении 20 ×.(n = 60)

Таблица 1

Удлинение стержней волос при указанной обработке (n = 60).

-Гингерол (20 мкг / мл)
Лечение Длина стержня волоса (мм) * п.
Контроль (0,1% (об. / Об.) ДМСО) 1,48 ± 0,20
6-гингерол (10 мкг / мл) 1,41 ± 0,23 0,11 0,11 1.06 ± 0,21 0,00

3,4 6-гингерол задерживает индукцию анагена из телогена у мышей

Приведенные выше результаты показывают только влияние 6-гингерола на культивированные DPC и волосяные фолликулы in vitro , что не так же, как и ситуация на месте. Чтобы преодолеть это ограничение, мы оценили роль 6-гингерола в росте волос in vivo с использованием мышей C57BL / 6 в возрасте 8 недель. Когда волосяные фолликулы дорсальной шерсти находились в фазе телогена, мышей брили на спине и выбирали тех, у которых была однородная кожа на стадии телогена. Кожу спины обрабатывали только носителем (контроль) или 6-гингеролом каждый день в течение 10 дней. показывает возобновление роста волос с 5-дневными интервалами для контроля и для лечения 6-гингеролом (например, 1 мг / мл 6-гингерола). У нормальных контрольных мышей наблюдали слабый рост волос через 10 дней после депиляции. Стало очевидно, что шерсть у мышей полностью отросла до исходного состояния в течение ~ 20 дней. После местного применения 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл, слабый рост волос наблюдался через 15 дней после депиляции, а редкий рост волос наблюдался через 20 дней после депиляции.Влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов дополнительно оценивали путем окрашивания H&E. Соответственно, местное применение 6-гингерола может значительно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой ().

Ингибирование индукции анагена телогена 6-гингеролом у мышей C57BL / 6.

После депиляции кожу спины обрабатывали носителем (справа) или 6-гингеролом в концентрации 1 мг / мл (слева) каждый день в течение 10 дней. Фотографии каждого животного делались каждые 5 дней.По сравнению с контролем, обработанным носителем, 6-гингерол в дозе 1 мг / мл может значительно ингибировать индукцию анагена телогеном. (A) нулевой день, (B) 5 дней, (C) 10 дней, (D) 15 дней и (E) 20 дней после депиляции. (F) Увеличенная фотография левой мыши в (E).

6-Гингерол уменьшал количество волосяных фолликулов у мышей C57 / BL6.

После депиляции спины кожу обрабатывали только носителем (контроль) или 1 мг / мл 6-гингерола каждый день в течение 10 дней. Действие 6-гингерола на волосяные фолликулы анализировали с помощью окрашивания H&E через 20 дней после депиляции.(а) - (в) Продольные срезы спинной кожи. (б) - (г) Поперечные срезы спинной кожи. Каждая шкала соответствует 200 мкм.

Обсуждение

Имбирь ( Z. officinale ) традиционно использовался в Восточной Азии для предотвращения выпадения волос и стимуляции роста волос. В настоящее время несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт имбиря, и заявляют, что он обладает эффектом против выпадения и роста волос [9], [10]; однако нет убедительных доказательств, подтверждающих заявленное влияние имбиря на рост волос. В этом исследовании было обнаружено, что 6-гингерол, основной активный компонент имбиря, значительно подавляет рост волос как in vitro , так и in vivo . Насколько нам известно, настоящее исследование является первым, в котором оценивается влияние 6-гингерола на рост волос. Наши результаты показывают, что 6-гингерол не способствует росту волос и может подавлять рост волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (уменьшая соотношение Bcl-2 / Bax).

Мы обнаружили, что 6-гингерол в диапазоне концентраций 5–10 мкг / мл вызывает значительное дозозависимое ингибирование пролиферации человеческих DPC ex vivo.Более того, 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляли удлинение стержня волоса (1,06 ± 0,21 мм) по сравнению с контрольной группой (1,48 ± 0,20 мм).

Было показано, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в основном за счет стимуляции митохондриального (внутреннего) пути гибели [20] - [22], который регулируется в основном белками семейства Bcl-2, в частности проапоптотическим Bax и антиапоптотическим Белки Bcl-2 [23], [24]. Принято считать, что Bcl-2 защищает клетки от апоптоза и что активность Bcl-2 определяется взаимодействием с Bax [25].Интересно, что Bcl-2 и Bax, как было показано, регулируют апоптоз волосяных фолликулов во время фазы регрессии цикла волос, вызванной апоптозом (катаген) [26], [27]. Эти данные привели к гипотезе о том, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в клетках волосяных фолликулов, регулируя уровни Bcl-2 и Bax. В этом исследовании мы показали, что 6-гингерол влияет на экспрессию Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC. Мы обнаружили, что 6-гингерол увеличивает Bax и снижает экспрессию Bcl-2 в культивируемых DPC. Обработка 6-гингеролом в течение 48 часов индуцировала значительное увеличение экспрессии Bax и снижение экспрессии Bcl-2 по сравнению с контрольной группой.Кроме того, белок Bax был активирован в зависимости от дозы 6-гингерола. На основании результатов этого и более ранних исследований [4], [12], [13], [26], [27] мы предполагаем, что 6-гингерол вызывает апоптоз в DPC, снижая уровень Bcl-2 и повышение уровня Bax.

Мы подтвердили, что 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса ex vivo, вызывая апоптотическое повреждение в DPC, но неясно, может ли 6-гингерол проникать в волосяные фолликулы и вызывать апоптотическое повреждение в DPC in vivo .По сравнению с ситуацией ex vivo, DPC в волосяных фолликулах in situ обладают более высокой устойчивостью к факторам повреждения [28]; Таким образом, чтобы определить, произошли ли наблюдаемые ex vivo изменения in vivo , мы исследовали ингибирующую рост волос активность 6-гингерола на 8-недельных мышах C57BL / 6 в стабильной и последовательной фазе телогена [19]. На выбритую кожу спины мышей C57BL / 6 ежедневно наносили местно 6-гингерол в течение 10 дней. У нормальных контрольных мышей слабый рост волос наблюдался через 10 дней, а полный рост наблюдался через 20 дней после депиляции.Однако в группе, получавшей 1 мг / мл 6-гингерола, через 15 дней наблюдалось только слабое отрастание волос, а через 20 дней после депиляции - редкое отрастание. Для дальнейшего изучения ингибирования роста волос мы оценили влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов путем окрашивания (H&E). Соответственно, местное применение 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл может существенно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой. Таким образом, было подтверждено, что первоначально наблюдаемые события in vitro фактически произошли in vivo .

Нежелательные волосы на теле могут быть эмоционально и социально разрушительными [29], что требует поиска различных методов лечения. Самый простой и популярный метод - это использование средств для депиляции, которые химически удаляют волосы с поверхности кожи, растворяя кератин, но имеют только временный эффект. К сожалению, есть некоторые побочные эффекты, такие как кожная аллергия, парадоксальный гипертрихоз или ожог кожи [30]. Согласно результатам настоящего исследования, 6-гингерол может снижать плотность волосяных фолликулов, вызывая апоптотические эффекты на DPC, и является потенциальным лекарством для стойкого удаления волос.

Таким образом, мы впервые сообщаем, что 6-гингерол не влияет на стимуляцию роста волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического действия на DPC in vitro и вызывать пролонгирование фазы телогена in vivo . Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос. Недостатки этого исследования заключаются в том, что в нем было немного меньше случаев, неизвестный эффект 6-гингерола на фолликулярные эпителиальные клетки и генетические изменения 6-гингерола на клетки сосочков дермы in vivo .Поэтому в будущих экспериментах, помимо увеличения размера выборки, мы должны проводить дальнейшие эксперименты для решения вышеупомянутых проблем.

Благодарности

Авторы благодарят Shengqi Wang, Boxin Zhao, Jindou Jiang, Zhehua Li и Zhidan Zhang за их техническую поддержку и критические обсуждения.

Отчет о финансировании

Эта работа была поддержана Китайским фондом естественных наук (грант № 31170949). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Список литературы

1. Cash TF (1999) Психосоциальные последствия андрогенетической алопеции: обзор исследовательской литературы. Br J Dermatol 141: 398–405. [PubMed] [Google Scholar] 2. Schmidt S, Fischer TW, Chren MM, Strauss BM, Elsner P (2001) Стратегии совладания и качества жизни у женщин с алопецией. Br J Dermatol 144: 1038–1043. [PubMed] [Google Scholar] 4. Квон О.С., Хан Дж. Х., Ю Х. Г., Чунг Дж. Х., Чо К. Х. и др. (2007) Увеличение роста человеческих волос in vitro с помощью эпигаллокатехин-3-галлата зеленого чая (EGCG).Фитомедицина 14: 551–555. [PubMed] [Google Scholar] 5. Kawano M, Han J, Kchouk ME, Isoda H (2009) Регулирование роста волос с помощью экстракта ароматического растения Erica multiflora. J Nat Med 63: 335–339. [PubMed] [Google Scholar] 6. Датта К., Сингх А.Т., Мукерджи А., Бхат Б., Рамеш Б. и др. (2009) Экстракт Eclipta alba, способствующий росту волос. J Этнофармакол 124: 450–456. [PubMed] [Google Scholar] 7. Ким С.К., Кан Джи, Ким М.К., Хён Дж. Х., Бу Х. Дж. И др. (2010) Стимулирующий эффект норгалантамина, компонента Crinum asiaticum, на рост волос.Eur J Dermatol 20: 42–48. [PubMed] [Google Scholar] 8. Park HJ, Zhang N, Park DK (2011) Местное применение экстракта Polygonum multiflorum индуцирует рост волос в покоящихся волосяных фолликулах за счет усиления экспрессии Shh и β-катенина у мышей C57BL / 6. J Этнофармакол 135: 369–375. [PubMed] [Google Scholar] 11. Cotsarelis G, Paus R (1999) Биология волосяных фолликулов. N Engl J Med 341: 491–497. [PubMed] [Google Scholar] 12. Хан Дж. Х., Квон О. С., Чунг Дж. Х., Чо К. Х., Ын Х. С. и др. (2004) Влияние миноксидила на пролиферацию и апоптоз клеток дермального сосочка волосяного фолликула человека.J Dermatol Sci 34: 91–98. [PubMed] [Google Scholar] 13. Луанпитпонг С., Нимманнит У., Чанворачот П., Леонард С.С., Понграхананон В. и др. (2011) Гидроксильный радикал опосредует индуцированный цисплатином апоптоз в клетках дермального сосочка волосяного фолликула человека и кератиноцитах посредством Bcl-2-зависимого механизма. Апоптоз 16: 769–782. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Али Б.Х., Блунден Г., Танира М.О., Неммар А. (2008) Некоторые фитохимические, фармакологические и токсикологические свойства имбиря (Zingiber officinale Roscoe): обзор недавних исследований.Food Chem Toxicol 46: 409–420. [PubMed] [Google Scholar] 15. Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM, D'Souza JJ, Pallaty PL, et al. (2011) Обновленная информация о химиопрофилактических эффектах имбиря и его фитохимических веществ. Crit Rev Food Sci Nutr 51: 499–523. [PubMed] [Google Scholar] 16. Филпотт М.П., ​​Грин М.Р., Кили Т. (1990) Рост человеческих волос in vitro. Cell Sci 97: 471–476. [PubMed] [Google Scholar] 17. Magerl M, Kauser S, Paus R, Tobin DJ (2002) Простой и быстрый метод выделения и культивирования фолликулярных сосочков из волосяных фолликулов кожи головы человека. Exp Дерматол 11: 381–385. [PubMed] [Google Scholar] 18. Мосманн Т. (1983) Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализов пролиферации и цитотоксичности. J Immunol методы 65: 55–63. [PubMed] [Google Scholar] 19. Müller-Röver S, Handjiski B, Eichmüller S, Foitzik K, McKay IA и др. (2001) Исчерпывающее руководство для точной классификации волосяных фолликулов мыши на разных стадиях цикла роста волос. J Invest Dermatol 117: 3–15. [PubMed] [Google Scholar] 20. Shukla Y, Prasad S, Tripathi C, Singh M, George J (2007) Модуляция in vitro и in vivo тестостерон-опосредованных изменений белков, связанных с апоптозом, с помощью [6] -гингерола.Мол Нутр Фуд Рес 51: 1492–1502. [PubMed] [Google Scholar] 21. Нигам Н., Джордж Дж., Шривастава С., Рой П., Бхуи К. и др. (2010) Индукция апоптоза [6] -гингеролом, связанная с модуляцией p53 и участием митохондриального сигнального пути в B [a] P-индуцированном онкогенезе кожи мышей. Рак Chemother Pharmacol 65: 687–696. [PubMed] [Google Scholar] 22. Lee C, Park GH, Kim CY, Jang JH (2011) [6] -Гингерол ослабляет вызванную β-амилоидом окислительную гибель клеток за счет усиления клеточной системы антиоксидантной защиты.Food Chem Toxicol 49: 1261–1269. [PubMed] [Google Scholar] 23. Mignotte B, Vayssiere JL (1998) Митохондрии и апоптоз. Eur J Biochem 252: 1–15. [PubMed] [Google Scholar] 24. Tsujimoto Y (1998) Роль белков семейства Bcl-2 в апоптозе: апоптосомы или митохондрии. Гены Клетки 3: 697–707. [PubMed] [Google Scholar] 25. Адамс Дж. М., Кори С. (1998) Семейство белков Bcl-2: арбитры выживания клеток. Наука 281: 1322–1326. [PubMed] [Google Scholar] 26. Мюллер-Ровер С., Росситер Х., Линднер Г., Петерс Э.М.Дж., Куппер Т.С. и др.(1999) Апоптоз волосяного фолликула и Bcl-2. J Investigate Dermatol Symp Proc 4: 272–277. [PubMed] [Google Scholar] 27. Бочкарева Н.В., Ахлувалия Г., Шандер Д. (2006) Апоптоз в волосяном фолликуле. J Invest Dermatol 126: 258–264. [PubMed] [Google Scholar] 28. Линднер Г., Бочкарев В. А., Бочкарева Н.В., Линг Г., Ван дер Вин С и др. (1997) Анализ апоптоза при регрессии волосяного фолликула (катаген). Am J Pathol 151: 1601–1617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Блюм-Пейтави У (2011) Обзор нежелательных женских волос.Br J Dermatol 165: 19–23. [PubMed] [Google Scholar] 30. Зумарас Дж., Квей Дж. С., Вандерворд Дж. (2008) Обзор случая пациентов с ожогами от эпиляции воском в период с января по ноябрь 2006 г., поступивших в больницу Royal North Shore. 34: 254–256. [PubMed] [Google Scholar]

6-Гингерол подавляет рост стержня волос в культивируемых фолликулах волос человека и модулирует рост волос у мышей

PLoS One. 2013; 8 (2): e57226.

, 1 , 2 , 3 , 1 , 1 , 1 и 1 , *

Юн Мяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ябин Сан

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Вэньцзюнь Ван

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Benjun Du

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Шун-э Сяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ицзюэ Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Чжици Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Майкл Хэмблин, редактор

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

MGH, MMS, Соединенные Штаты Америки,

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Задумал и спроектировал эксперименты: ZH YM. Проведены эксперименты: YM YS SX. Проанализированы данные: WW BD. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: YH YS. Написал статью: Ю.М.

Поступила 28 июля 2012 г .; Принято 18 января 2013 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используется для сдерживания выпадения и стимуляции роста волос в Восточной Азии. Несколько компаний производят шампунь, содержащий экстракт имбиря, который, как утверждается, обладает свойствами против выпадения и стимулирования роста волос. Однако нет никаких научных доказательств, подтверждающих эти утверждения. Это исследование было предпринято для измерения 6-гингерола, основного активного компонента имбиря, на удлинение стержня волоса in vitro и рост волос in vivo , а также для изучения его влияния на клетки дермального сосочка человека (DPC) in vivo и in vitro. 6-Гингерол подавлял рост волос в волосяных фолликулах в культуре и пролиферацию культивированных DPC. Ингибирование роста DPC 6-гингеролом in vitro может отражать снижение отношения Bcl-2 / Bax. Аналогичные результаты были получены in vivo . Результаты этого исследования показали, что 6-гингерол не обладает способностью стимулировать рост волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического воздействия на DPC in vitro и может вызывать удлинение телогена. фаза in vivo .Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос.

Введение

Волосы - это защитный придаток на теле, который считается вспомогательной структурой покровов. Хотя нарушение и потеря волосяных фолликулов и изменения в производстве волосяных волокон у людей, как правило, не опасны для жизни, их глубокое влияние на социальные взаимодействия и психологическое благополучие пациентов неоспоримо [1], [2] что, в свою очередь, увеличивает требования к возможным вариантам лечения и превращает средства для лечения выпадения волос в индустрию с многомиллионным оборотом. Несмотря на это, большинство современных продуктов неэффективны, о чем свидетельствует тот факт, что FDA одобрило только два метода лечения выпадения волос [3]. Учитывая ограниченную, временную и несколько непредсказуемую эффективность одобренных в настоящее время лекарств от выпадения волос [3], необходимы новые фармакологические методы лечения и средства. Было много попыток найти материалы из традиционных лекарственных трав, которые предотвращают выпадение волос [4] - [8]. Например, зеленый чай, клубнеплодный цветок ( Polygonum multiflorum Thunb) и имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используются в Восточной Азии для лечения пациентов, страдающих облысением и выпадением волос.Несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт P. multiflorum или экстракты имбиря, которые, как утверждается, обладают свойствами против выпадения и стимулирования роста волос [9], [10]. Недавно несколько исследований показали, что зеленый чай [4] или экстракт P. multiflorum [8] могут способствовать росту волос; тем не менее, нет никаких научных доказательств, подтверждающих это утверждение об имбире.

Волосяной фолликул млекопитающих содержит дермальный сосочек (DP), который в основном состоит из DP-клеток (DPC), и дермальную оболочку, происходящую из мезенхимы, а также эпителиальные клетки наружной корневой оболочки, внутренней корневой оболочки, матрицы и стержня волоса происходит из эпителия [11].Постнатальный волосяной фолликул проходит цикл анагена (фаза роста), катагена (фаза регресса) и телогена (фаза покоя). Взаимные взаимодействия между эпителием и мезенхимой важны для послеродового роста волос и цикличности волосяных фолликулов. DP, как известно, играет ключевую роль в регуляции роста волос и цикличности [11]. Таким образом, любой фактор, который влияет на функции DPC, может влиять на рост волос. Например, миноксидил [12] и эпигаллокатехин-3-галлат [4] стимулируют рост волос, оказывая свое антиапоптотическое действие на DPC (за счет увеличения соотношения Bcl-2 / Bax), это один из механизмов воздействия на Миноксидил.С другой стороны, цисплатин [13] приводит к выпадению волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (за счет уменьшения отношения Bcl-2 / Bax).

В последнее время было проведено несколько научных исследований, направленных на выделение и идентификацию активных компонентов имбиря, а также на научную проверку его фармакологического действия и действия его составляющих [14], [15]. Результаты показывают, что 6-гингерол является наиболее распространенным активным компонентом и обладает различными фармакологическими и микробиологическими эффектами, включая противоопухолевое, противовоспалительное, антиоксидантное и противорвотное действие; Однако фармакологические эффекты 6-гингерола на рост волос научно не доказаны.

В этом исследовании мы исследовали эффекты 6-гингерола на человеческие DPC и рост волосяного стержня ex vivo и рост волос у мышей.

Материалы и методы

2.1. Выделение и культивирование волосяных фолликулов человека

Образцы пункционной биопсии (4 мм) были взяты с неболедых затылочных костей головы пациентов, перенесших операцию по трансплантации волос по поводу андрогенной алопеции. Медицинский этический комитет Южного медицинского университета одобрил все исследования, описанные здесь.Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией принципов, и от всех пациентов было получено информированное письменное согласие. Волосяные фолликулы выделяли и культивировали, как описано Philpott et al [16]. Вкратце, волосяные фолликулы выделяли щипцами под бинокулярным световым микроскопом и культивировали в 24-луночных чашках в течение 7 дней в среде Williams E (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) с добавлением 10 нг / мл гидрокортизона, 10 мг / мл инсулина 2. мМ L-глутамин, 100 Ед / мл стрептомицина и 10 нг / мл гидрокортизона при 37 ° C в атмосфере 5% (об. / об.) CO 2 .6-Гингерол (чистота> 95%; Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО; Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай) и для сохранения конечной концентрации носителя < 0,1%. 6-Гингерол добавляли в культуральную среду в концентрации 10 или 20 мкг / мл, и 0,1% (об. / Об.) ДМСО использовали в качестве контроля. Во всех экспериментах культуральную среду и 6-гингерол обновляли через день. Всего 180 анагенных волосяных фолликулов от 3 разных добровольцев (60 фолликулов / субъект) культивировали при каждом условии роста.Средняя длина волосяного фолликула от дна дермальных сосочков в нулевой день составляла 4,5 мм.

2.2. Культура человеческих DPC

DPC выделяли и культивировали, как описано Magerl et al [17]. Вкратце, кожные сосочки были микродиссектированы с луковиц рассеченных волосяных фолликулов, перенесены на пластиковые чашки и культивированы в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Gibco, Grand Island, NY) с добавлением 100 Ед / мл пенициллина, 100 мг / мл стрептомицина и 20 мг / мл. % (об. / об.) фетальной бычьей сыворотки (FBS; Gibco) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 .Эксплантаты выдерживали в среде в течение 7 дней, среду меняли каждые 3 дня. Когда рост клеток становился субконфлюэнтным, клетки собирали с 0,25% (мас. / Об.) Трипсин-ЭДТА (Invitrogen, Carlsbad, CA) и субкультивировали с соотношением деления 1: 3. После этого DPC поддерживали в DMEM с добавлением 10% FBS.

2.3 Анализы пролиферации клеток и апоптоза

Пролиферацию клеток определяли с помощью анализа МТТ, как описано Мосманном [18]. Вкратце, DPC (3 × 10 4 клеток / лунку) высевали в 96-луночные планшеты и инкубировали в течение 24 часов перед добавлением 6-гингерола в концентрации 5 или 10 мкг / мл, а затем инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов, используя 0.1% ДМСО в качестве отрицательного контроля. Поглощение при 490 нм измеряли с использованием ридера для ELISA. Относительную жизнеспособность клеток рассчитывали путем деления оптической плотности обработанных клеток на оптическую плотность необработанных клеток в каждом эксперименте.

DPC, высеянные в 6-луночные планшеты с плотностью 2,5 × 10 5 клеток / лунку обрабатывали 5 или 10 мкг / мл 6-гингерола или 0,1% ДМСО в качестве контроля в течение 48 часов. Апоптоз клеток исследовали с использованием набора для обнаружения аннексина V (Caltag-Medsystems Ltd., Buckingham, UK) в соответствии с инструкциями производителя.Сбор и анализ данных проводились на цитометре FACSort (FAC-SCA, New York, NY). Минимум 2,5 × 10 5 событий клеток было получено для каждой группы в процессе анализа, и каждый эксперимент повторяли не менее 3 раз.

2.4 Вестерн-блоттинг

И контрольные, и обработанные 6-гингеролом DPC собирали через 48 часов после обработки. Готовили полные клеточные лизаты и 30 мкг белка подвергали электрофорезу в додецилсульфате натрия / полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с последующим иммуноблот-анализом.Первичные антитела инкубировали при соответствующих разведениях: моноклональное антитело против Bcl-2, 1: 500; моноклональное антитело против Bax, 1: 500; и моноклональное антитело против GAPDH, 1: 1000 (Santa Cruz Biotechnology Inc., Санта-Крус, Калифорния). Иммунные комплексы детектировали с использованием набора для вестерн-блоттинга с усиленной хемилюминесценцией (ECL) (Santa Cruz) и количественно определяли с использованием программного обеспечения для денситометрии аналитик / ПК (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA).

2.5 Анализ 6-гингерола in vivo

Всего 36 самок мышей C57BL / 6 (возраст 8 недель) были приобретены в Центре экспериментальных животных Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай) и случайным образом разделены на 3 группы (12 /группа).Анаген был индуцирован депиляцией кожи на спине мышей C57BL / 6, которые находились в фазе телогена цикла, как описано [19]. Вкратце, волосы удаляли путем местного применения тиогликолата кальция. Со следующего дня (день 1) 0,2 мл 0,1 мг / мл или 1 мг / мл 6-гингерола в 75% (об. / Об.) Этаноле наносили на кожу спины каждого животного каждый день в течение 10 дней. Контрольные животные получали только раствор носителя. Каждые 5 дней после депиляции за спиной каждой мыши наблюдали и фотографировали.Все эксперименты длились 20 дней, после чего мышей умерщвляли. Гистологию образцов кожи, взятых со спины каждой мыши, исследовали с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (H&E). Все экспериментальные манипуляции проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Национальных институтов здравоохранения и с одобрения Комитета по этике экспериментальных животных Южного медицинского университета.

2.6 Статистический анализ

Все данные выражены как среднее ± стандартное отклонение от трех независимых экспериментов.Весь статистический анализ проводился с помощью SPSS 13.0. Различия между экспериментальными группами оценивали с помощью теста Стьюдента t . Статистически значимая разница была установлена ​​на уровне P <0,05.

Результаты

3.1 6-гингерол значительно подавляет рост DPC и индуцирует апоптоз клеток

Чтобы изучить влияние 6-гингерола на пролиферацию DPC, мы обрабатывали DPC ДМСО (контроль) или 6-гингеролом (5 или 10 мкг / мл). В течение 48 часов культивирования 6-гингерол проявлял значительный дозозависимый ингибирующий эффект на DPC ().Чтобы определить механизмы, лежащие в основе роста ингибированных 6-гингеролом DPC, влияние 6-гингерола на апоптоз клеток оценивали путем окрашивания флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) и аннексином V. Соответственно, воздействие 6-гингерола на DPC значительно увеличивало апоптоз клеток. по сравнению с контрольной группой, что позволяет предположить, что апоптоз является механизмом, лежащим в основе цитотоксичности, вызванной 6-гингеролом ().

Ингибирование роста и индукция эффектов апоптоза 6-гингерола на человеческие DPC. in vitro.

DPC культивировали с различными концентрациями 6-гингерола в течение 48 часов. По сравнению с контролем, обработанным носителем, обработка 10 мкг / мл 6-гингерола значительно ингибировала пролиферацию клеток. (А) Жизнеспособность клеток определяли с помощью анализа МТТ. * P <0,05 по сравнению с контролем, обработанным носителем. (B) Анализ клеток на апоптоз.

3.2 Влияние лечения 6-гингеролом на регуляторные белки апоптоза

Ранее было показано, что 6-гингерол вызывает апоптоз через путь гибели митохондрий [20] - [22].Поскольку известно, что этот путь апоптоза регулируется балансом анти- и проапоптотических белков семейства Bcl-2 [23], [24], мы исследовали уровень экспрессии двух ключевых белков семейства Bcl-2 Bcl. -2 и Bax в ответ на обработку DPC 6-гингеролом. Исследования иммуноблоттинга показывают, что 6-гингерол индуцировал значительное подавление антиапоптотического белка Bcl-2 и повышение проапоптотического белка Bax по сравнению с контролем, обработанным носителем. Кроме того, уровень белка Bax был повышен дозозависимым образом от 6-гингерола ( P <0.05) ().

Влияние 6-гингерола на экспрессию белков Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC.

(A) DPC обрабатывали указанными концентрациями 6-гингерола (0,1% ДМСО контроль) в течение 48 часов и подвергали вестерн-блоттингу. Показаны репрезентативные полосы. (B) Гистограммы, показывающие количественную оценку полос вестерн-блоттинга. GAPDH использовался в качестве внутреннего контроля. * P <0,05 по сравнению с контрольной (0,1% ДМСО) группой.

3,3 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса в культивируемых волосяных фолликулах человека

Поскольку DP играет ключевую роль в регуляции роста волос, мы исследовали влияние 6-гингерола на удлинение стержня волоса. Волосяные фолликулы кожи головы человека выделяли и культивировали как в отсутствие, так и в присутствии 6-гингерола. Мы наблюдали, что 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляют удлинение стержней волос (и).

Ингибирующий эффект 6-гингерола на удлинение стержней волос человека in vitro.

Волосяные фолликулы обрабатывали 6-гингеролом в различных концентрациях в течение 7 дней, а удлинение стержней человеческих волос измеряли с помощью калиброванной сетки окуляра в световом микроскопе при увеличении 20 ×.(n = 60)

Таблица 1

Удлинение стержней волос при указанной обработке (n = 60).

-Гингерол (20 мкг / мл)
Лечение Длина стержня волоса (мм) * п.
Контроль (0,1% (об. / Об.) ДМСО) 1,48 ± 0,20
6-гингерол (10 мкг / мл) 1,41 ± 0,23 0,11 0,11 1.06 ± 0,21 0,00

3,4 6-гингерол задерживает индукцию анагена из телогена у мышей

Приведенные выше результаты показывают только влияние 6-гингерола на культивированные DPC и волосяные фолликулы in vitro , что не так же, как и ситуация на месте. Чтобы преодолеть это ограничение, мы оценили роль 6-гингерола в росте волос in vivo с использованием мышей C57BL / 6 в возрасте 8 недель. Когда волосяные фолликулы дорсальной шерсти находились в фазе телогена, мышей брили на спине и выбирали тех, у которых была однородная кожа на стадии телогена. Кожу спины обрабатывали только носителем (контроль) или 6-гингеролом каждый день в течение 10 дней. показывает возобновление роста волос с 5-дневными интервалами для контроля и для лечения 6-гингеролом (например, 1 мг / мл 6-гингерола). У нормальных контрольных мышей наблюдали слабый рост волос через 10 дней после депиляции. Стало очевидно, что шерсть у мышей полностью отросла до исходного состояния в течение ~ 20 дней. После местного применения 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл, слабый рост волос наблюдался через 15 дней после депиляции, а редкий рост волос наблюдался через 20 дней после депиляции.Влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов дополнительно оценивали путем окрашивания H&E. Соответственно, местное применение 6-гингерола может значительно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой ().

Ингибирование индукции анагена телогена 6-гингеролом у мышей C57BL / 6.

После депиляции кожу спины обрабатывали носителем (справа) или 6-гингеролом в концентрации 1 мг / мл (слева) каждый день в течение 10 дней. Фотографии каждого животного делались каждые 5 дней.По сравнению с контролем, обработанным носителем, 6-гингерол в дозе 1 мг / мл может значительно ингибировать индукцию анагена телогеном. (A) нулевой день, (B) 5 дней, (C) 10 дней, (D) 15 дней и (E) 20 дней после депиляции. (F) Увеличенная фотография левой мыши в (E).

6-Гингерол уменьшал количество волосяных фолликулов у мышей C57 / BL6.

После депиляции спины кожу обрабатывали только носителем (контроль) или 1 мг / мл 6-гингерола каждый день в течение 10 дней. Действие 6-гингерола на волосяные фолликулы анализировали с помощью окрашивания H&E через 20 дней после депиляции.(а) - (в) Продольные срезы спинной кожи. (б) - (г) Поперечные срезы спинной кожи. Каждая шкала соответствует 200 мкм.

Обсуждение

Имбирь ( Z. officinale ) традиционно использовался в Восточной Азии для предотвращения выпадения волос и стимуляции роста волос. В настоящее время несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт имбиря, и заявляют, что он обладает эффектом против выпадения и роста волос [9], [10]; однако нет убедительных доказательств, подтверждающих заявленное влияние имбиря на рост волос. В этом исследовании было обнаружено, что 6-гингерол, основной активный компонент имбиря, значительно подавляет рост волос как in vitro , так и in vivo . Насколько нам известно, настоящее исследование является первым, в котором оценивается влияние 6-гингерола на рост волос. Наши результаты показывают, что 6-гингерол не способствует росту волос и может подавлять рост волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (уменьшая соотношение Bcl-2 / Bax).

Мы обнаружили, что 6-гингерол в диапазоне концентраций 5–10 мкг / мл вызывает значительное дозозависимое ингибирование пролиферации человеческих DPC ex vivo.Более того, 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляли удлинение стержня волоса (1,06 ± 0,21 мм) по сравнению с контрольной группой (1,48 ± 0,20 мм).

Было показано, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в основном за счет стимуляции митохондриального (внутреннего) пути гибели [20] - [22], который регулируется в основном белками семейства Bcl-2, в частности проапоптотическим Bax и антиапоптотическим Белки Bcl-2 [23], [24]. Принято считать, что Bcl-2 защищает клетки от апоптоза и что активность Bcl-2 определяется взаимодействием с Bax [25].Интересно, что Bcl-2 и Bax, как было показано, регулируют апоптоз волосяных фолликулов во время фазы регрессии цикла волос, вызванной апоптозом (катаген) [26], [27]. Эти данные привели к гипотезе о том, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в клетках волосяных фолликулов, регулируя уровни Bcl-2 и Bax. В этом исследовании мы показали, что 6-гингерол влияет на экспрессию Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC. Мы обнаружили, что 6-гингерол увеличивает Bax и снижает экспрессию Bcl-2 в культивируемых DPC. Обработка 6-гингеролом в течение 48 часов индуцировала значительное увеличение экспрессии Bax и снижение экспрессии Bcl-2 по сравнению с контрольной группой.Кроме того, белок Bax был активирован в зависимости от дозы 6-гингерола. На основании результатов этого и более ранних исследований [4], [12], [13], [26], [27] мы предполагаем, что 6-гингерол вызывает апоптоз в DPC, снижая уровень Bcl-2 и повышение уровня Bax.

Мы подтвердили, что 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса ex vivo, вызывая апоптотическое повреждение в DPC, но неясно, может ли 6-гингерол проникать в волосяные фолликулы и вызывать апоптотическое повреждение в DPC in vivo .По сравнению с ситуацией ex vivo, DPC в волосяных фолликулах in situ обладают более высокой устойчивостью к факторам повреждения [28]; Таким образом, чтобы определить, произошли ли наблюдаемые ex vivo изменения in vivo , мы исследовали ингибирующую рост волос активность 6-гингерола на 8-недельных мышах C57BL / 6 в стабильной и последовательной фазе телогена [19]. На выбритую кожу спины мышей C57BL / 6 ежедневно наносили местно 6-гингерол в течение 10 дней. У нормальных контрольных мышей слабый рост волос наблюдался через 10 дней, а полный рост наблюдался через 20 дней после депиляции.Однако в группе, получавшей 1 мг / мл 6-гингерола, через 15 дней наблюдалось только слабое отрастание волос, а через 20 дней после депиляции - редкое отрастание. Для дальнейшего изучения ингибирования роста волос мы оценили влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов путем окрашивания (H&E). Соответственно, местное применение 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл может существенно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой. Таким образом, было подтверждено, что первоначально наблюдаемые события in vitro фактически произошли in vivo .

Нежелательные волосы на теле могут быть эмоционально и социально разрушительными [29], что требует поиска различных методов лечения. Самый простой и популярный метод - это использование средств для депиляции, которые химически удаляют волосы с поверхности кожи, растворяя кератин, но имеют только временный эффект. К сожалению, есть некоторые побочные эффекты, такие как кожная аллергия, парадоксальный гипертрихоз или ожог кожи [30]. Согласно результатам настоящего исследования, 6-гингерол может снижать плотность волосяных фолликулов, вызывая апоптотические эффекты на DPC, и является потенциальным лекарством для стойкого удаления волос.

Таким образом, мы впервые сообщаем, что 6-гингерол не влияет на стимуляцию роста волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического действия на DPC in vitro и вызывать пролонгирование фазы телогена in vivo . Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос. Недостатки этого исследования заключаются в том, что в нем было немного меньше случаев, неизвестный эффект 6-гингерола на фолликулярные эпителиальные клетки и генетические изменения 6-гингерола на клетки сосочков дермы in vivo .Поэтому в будущих экспериментах, помимо увеличения размера выборки, мы должны проводить дальнейшие эксперименты для решения вышеупомянутых проблем.

Благодарности

Авторы благодарят Shengqi Wang, Boxin Zhao, Jindou Jiang, Zhehua Li и Zhidan Zhang за их техническую поддержку и критические обсуждения.

Отчет о финансировании

Эта работа была поддержана Китайским фондом естественных наук (грант № 31170949). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Список литературы

1. Cash TF (1999) Психосоциальные последствия андрогенетической алопеции: обзор исследовательской литературы. Br J Dermatol 141: 398–405. [PubMed] [Google Scholar] 2. Schmidt S, Fischer TW, Chren MM, Strauss BM, Elsner P (2001) Стратегии совладания и качества жизни у женщин с алопецией. Br J Dermatol 144: 1038–1043. [PubMed] [Google Scholar] 4. Квон О.С., Хан Дж. Х., Ю Х. Г., Чунг Дж. Х., Чо К. Х. и др. (2007) Увеличение роста человеческих волос in vitro с помощью эпигаллокатехин-3-галлата зеленого чая (EGCG).Фитомедицина 14: 551–555. [PubMed] [Google Scholar] 5. Kawano M, Han J, Kchouk ME, Isoda H (2009) Регулирование роста волос с помощью экстракта ароматического растения Erica multiflora. J Nat Med 63: 335–339. [PubMed] [Google Scholar] 6. Датта К., Сингх А.Т., Мукерджи А., Бхат Б., Рамеш Б. и др. (2009) Экстракт Eclipta alba, способствующий росту волос. J Этнофармакол 124: 450–456. [PubMed] [Google Scholar] 7. Ким С.К., Кан Джи, Ким М.К., Хён Дж. Х., Бу Х. Дж. И др. (2010) Стимулирующий эффект норгалантамина, компонента Crinum asiaticum, на рост волос.Eur J Dermatol 20: 42–48. [PubMed] [Google Scholar] 8. Park HJ, Zhang N, Park DK (2011) Местное применение экстракта Polygonum multiflorum индуцирует рост волос в покоящихся волосяных фолликулах за счет усиления экспрессии Shh и β-катенина у мышей C57BL / 6. J Этнофармакол 135: 369–375. [PubMed] [Google Scholar] 11. Cotsarelis G, Paus R (1999) Биология волосяных фолликулов. N Engl J Med 341: 491–497. [PubMed] [Google Scholar] 12. Хан Дж. Х., Квон О. С., Чунг Дж. Х., Чо К. Х., Ын Х. С. и др. (2004) Влияние миноксидила на пролиферацию и апоптоз клеток дермального сосочка волосяного фолликула человека.J Dermatol Sci 34: 91–98. [PubMed] [Google Scholar] 13. Луанпитпонг С., Нимманнит У., Чанворачот П., Леонард С.С., Понграхананон В. и др. (2011) Гидроксильный радикал опосредует индуцированный цисплатином апоптоз в клетках дермального сосочка волосяного фолликула человека и кератиноцитах посредством Bcl-2-зависимого механизма. Апоптоз 16: 769–782. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Али Б.Х., Блунден Г., Танира М.О., Неммар А. (2008) Некоторые фитохимические, фармакологические и токсикологические свойства имбиря (Zingiber officinale Roscoe): обзор недавних исследований.Food Chem Toxicol 46: 409–420. [PubMed] [Google Scholar] 15. Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM, D'Souza JJ, Pallaty PL, et al. (2011) Обновленная информация о химиопрофилактических эффектах имбиря и его фитохимических веществ. Crit Rev Food Sci Nutr 51: 499–523. [PubMed] [Google Scholar] 16. Филпотт М.П., ​​Грин М.Р., Кили Т. (1990) Рост человеческих волос in vitro. Cell Sci 97: 471–476. [PubMed] [Google Scholar] 17. Magerl M, Kauser S, Paus R, Tobin DJ (2002) Простой и быстрый метод выделения и культивирования фолликулярных сосочков из волосяных фолликулов кожи головы человека.Exp Дерматол 11: 381–385. [PubMed] [Google Scholar] 18. Мосманн Т. (1983) Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализов пролиферации и цитотоксичности. J Immunol методы 65: 55–63. [PubMed] [Google Scholar] 19. Müller-Röver S, Handjiski B, Eichmüller S, Foitzik K, McKay IA и др. (2001) Исчерпывающее руководство для точной классификации волосяных фолликулов мыши на разных стадиях цикла роста волос. J Invest Dermatol 117: 3–15. [PubMed] [Google Scholar] 20. Shukla Y, Prasad S, Tripathi C, Singh M, George J (2007) Модуляция in vitro и in vivo тестостерон-опосредованных изменений белков, связанных с апоптозом, с помощью [6] -гингерола.Мол Нутр Фуд Рес 51: 1492–1502. [PubMed] [Google Scholar] 21. Нигам Н., Джордж Дж., Шривастава С., Рой П., Бхуи К. и др. (2010) Индукция апоптоза [6] -гингеролом, связанная с модуляцией p53 и участием митохондриального сигнального пути в B [a] P-индуцированном онкогенезе кожи мышей. Рак Chemother Pharmacol 65: 687–696. [PubMed] [Google Scholar] 22. Lee C, Park GH, Kim CY, Jang JH (2011) [6] -Гингерол ослабляет вызванную β-амилоидом окислительную гибель клеток за счет усиления клеточной системы антиоксидантной защиты.Food Chem Toxicol 49: 1261–1269. [PubMed] [Google Scholar] 23. Mignotte B, Vayssiere JL (1998) Митохондрии и апоптоз. Eur J Biochem 252: 1–15. [PubMed] [Google Scholar] 24. Tsujimoto Y (1998) Роль белков семейства Bcl-2 в апоптозе: апоптосомы или митохондрии. Гены Клетки 3: 697–707. [PubMed] [Google Scholar] 25. Адамс Дж. М., Кори С. (1998) Семейство белков Bcl-2: арбитры выживания клеток. Наука 281: 1322–1326. [PubMed] [Google Scholar] 26. Мюллер-Ровер С., Росситер Х., Линднер Г., Петерс Э.М.Дж., Куппер Т.С. и др.(1999) Апоптоз волосяного фолликула и Bcl-2. J Investigate Dermatol Symp Proc 4: 272–277. [PubMed] [Google Scholar] 27. Бочкарева Н.В., Ахлувалия Г., Шандер Д. (2006) Апоптоз в волосяном фолликуле. J Invest Dermatol 126: 258–264. [PubMed] [Google Scholar] 28. Линднер Г., Бочкарев В.А., Бочкарева Н.В., Линг Г., Ван дер Вин С и др. (1997) Анализ апоптоза при регрессии волосяного фолликула (катаген). Am J Pathol 151: 1601–1617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Блюм-Пейтави У (2011) Обзор нежелательных женских волос.Br J Dermatol 165: 19–23. [PubMed] [Google Scholar] 30. Зумарас Дж., Квей Дж. С., Вандерворд Дж. (2008) Обзор случая пациентов с ожогами от эпиляции воском в период с января по ноябрь 2006 г., поступивших в больницу Royal North Shore. 34: 254–256. [PubMed] [Google Scholar]

6-Гингерол подавляет рост стержня волос в культивируемых фолликулах волос человека и модулирует рост волос у мышей

PLoS One. 2013; 8 (2): e57226.

, 1 , 2 , 3 , 1 , 1 , 1 и 1 , *

Юн Мяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ябин Сан

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Вэньцзюнь Ван

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Benjun Du

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Шун-э Сяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ицзюэ Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Чжици Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Майкл Хэмблин, редактор

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

MGH, MMS, Соединенные Штаты Америки,

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Задумал и спроектировал эксперименты: ZH YM. Проведены эксперименты: YM YS SX. Проанализированы данные: WW BD. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: YH YS. Написал статью: Ю.М.

Поступила 28 июля 2012 г .; Принято 18 января 2013 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используется для сдерживания выпадения и стимуляции роста волос в Восточной Азии. Несколько компаний производят шампунь, содержащий экстракт имбиря, который, как утверждается, обладает свойствами против выпадения и стимулирования роста волос. Однако нет никаких научных доказательств, подтверждающих эти утверждения. Это исследование было предпринято для измерения 6-гингерола, основного активного компонента имбиря, на удлинение стержня волоса in vitro и рост волос in vivo , а также для изучения его влияния на клетки дермального сосочка человека (DPC) in vivo и in vitro. 6-Гингерол подавлял рост волос в волосяных фолликулах в культуре и пролиферацию культивированных DPC. Ингибирование роста DPC 6-гингеролом in vitro может отражать снижение отношения Bcl-2 / Bax. Аналогичные результаты были получены in vivo . Результаты этого исследования показали, что 6-гингерол не обладает способностью стимулировать рост волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического воздействия на DPC in vitro и может вызывать удлинение телогена. фаза in vivo .Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос.

Введение

Волосы - это защитный придаток на теле, который считается вспомогательной структурой покровов. Хотя нарушение и потеря волосяных фолликулов и изменения в производстве волосяных волокон у людей, как правило, не опасны для жизни, их глубокое влияние на социальные взаимодействия и психологическое благополучие пациентов неоспоримо [1], [2] что, в свою очередь, увеличивает требования к возможным вариантам лечения и превращает средства для лечения выпадения волос в индустрию с многомиллионным оборотом.Несмотря на это, большинство современных продуктов неэффективны, о чем свидетельствует тот факт, что FDA одобрило только два метода лечения выпадения волос [3]. Учитывая ограниченную, временную и несколько непредсказуемую эффективность одобренных в настоящее время лекарств от выпадения волос [3], необходимы новые фармакологические методы лечения и средства. Было много попыток найти материалы из традиционных лекарственных трав, которые предотвращают выпадение волос [4] - [8]. Например, зеленый чай, клубнеплодный цветок ( Polygonum multiflorum Thunb) и имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используются в Восточной Азии для лечения пациентов, страдающих облысением и выпадением волос.Несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт P. multiflorum или экстракты имбиря, которые, как утверждается, обладают свойствами против выпадения и стимулирования роста волос [9], [10]. Недавно несколько исследований показали, что зеленый чай [4] или экстракт P. multiflorum [8] могут способствовать росту волос; тем не менее, нет никаких научных доказательств, подтверждающих это утверждение об имбире.

Волосяной фолликул млекопитающих содержит дермальный сосочек (DP), который в основном состоит из DP-клеток (DPC), и дермальную оболочку, происходящую из мезенхимы, а также эпителиальные клетки наружной корневой оболочки, внутренней корневой оболочки, матрицы и стержня волоса происходит из эпителия [11].Постнатальный волосяной фолликул проходит цикл анагена (фаза роста), катагена (фаза регресса) и телогена (фаза покоя). Взаимные взаимодействия между эпителием и мезенхимой важны для послеродового роста волос и цикличности волосяных фолликулов. DP, как известно, играет ключевую роль в регуляции роста волос и цикличности [11]. Таким образом, любой фактор, который влияет на функции DPC, может влиять на рост волос. Например, миноксидил [12] и эпигаллокатехин-3-галлат [4] стимулируют рост волос, оказывая свое антиапоптотическое действие на DPC (за счет увеличения соотношения Bcl-2 / Bax), это один из механизмов воздействия на Миноксидил.С другой стороны, цисплатин [13] приводит к выпадению волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (за счет уменьшения отношения Bcl-2 / Bax).

В последнее время было проведено несколько научных исследований, направленных на выделение и идентификацию активных компонентов имбиря, а также на научную проверку его фармакологического действия и действия его составляющих [14], [15]. Результаты показывают, что 6-гингерол является наиболее распространенным активным компонентом и обладает различными фармакологическими и микробиологическими эффектами, включая противоопухолевое, противовоспалительное, антиоксидантное и противорвотное действие; Однако фармакологические эффекты 6-гингерола на рост волос научно не доказаны.

В этом исследовании мы исследовали эффекты 6-гингерола на человеческие DPC и рост волосяного стержня ex vivo и рост волос у мышей.

Материалы и методы

2.1. Выделение и культивирование волосяных фолликулов человека

Образцы пункционной биопсии (4 мм) были взяты с неболедых затылочных костей головы пациентов, перенесших операцию по трансплантации волос по поводу андрогенной алопеции. Медицинский этический комитет Южного медицинского университета одобрил все исследования, описанные здесь.Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией принципов, и от всех пациентов было получено информированное письменное согласие. Волосяные фолликулы выделяли и культивировали, как описано Philpott et al [16]. Вкратце, волосяные фолликулы выделяли щипцами под бинокулярным световым микроскопом и культивировали в 24-луночных чашках в течение 7 дней в среде Williams E (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) с добавлением 10 нг / мл гидрокортизона, 10 мг / мл инсулина 2. мМ L-глутамин, 100 Ед / мл стрептомицина и 10 нг / мл гидрокортизона при 37 ° C в атмосфере 5% (об. / об.) CO 2 .6-Гингерол (чистота> 95%; Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО; Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай) и для сохранения конечной концентрации носителя < 0,1%. 6-Гингерол добавляли в культуральную среду в концентрации 10 или 20 мкг / мл, и 0,1% (об. / Об.) ДМСО использовали в качестве контроля. Во всех экспериментах культуральную среду и 6-гингерол обновляли через день. Всего 180 анагенных волосяных фолликулов от 3 разных добровольцев (60 фолликулов / субъект) культивировали при каждом условии роста.Средняя длина волосяного фолликула от дна дермальных сосочков в нулевой день составляла 4,5 мм.

2.2. Культура человеческих DPC

DPC выделяли и культивировали, как описано Magerl et al [17]. Вкратце, кожные сосочки были микродиссектированы с луковиц рассеченных волосяных фолликулов, перенесены на пластиковые чашки и культивированы в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Gibco, Grand Island, NY) с добавлением 100 Ед / мл пенициллина, 100 мг / мл стрептомицина и 20 мг / мл. % (об. / об.) фетальной бычьей сыворотки (FBS; Gibco) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 .Эксплантаты выдерживали в среде в течение 7 дней, среду меняли каждые 3 дня. Когда рост клеток становился субконфлюэнтным, клетки собирали с 0,25% (мас. / Об.) Трипсин-ЭДТА (Invitrogen, Carlsbad, CA) и субкультивировали с соотношением деления 1: 3. После этого DPC поддерживали в DMEM с добавлением 10% FBS.

2.3 Анализы пролиферации клеток и апоптоза

Пролиферацию клеток определяли с помощью анализа МТТ, как описано Мосманном [18]. Вкратце, DPC (3 × 10 4 клеток / лунку) высевали в 96-луночные планшеты и инкубировали в течение 24 часов перед добавлением 6-гингерола в концентрации 5 или 10 мкг / мл, а затем инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов, используя 0.1% ДМСО в качестве отрицательного контроля. Поглощение при 490 нм измеряли с использованием ридера для ELISA. Относительную жизнеспособность клеток рассчитывали путем деления оптической плотности обработанных клеток на оптическую плотность необработанных клеток в каждом эксперименте.

DPC, высеянные в 6-луночные планшеты с плотностью 2,5 × 10 5 клеток / лунку обрабатывали 5 или 10 мкг / мл 6-гингерола или 0,1% ДМСО в качестве контроля в течение 48 часов. Апоптоз клеток исследовали с использованием набора для обнаружения аннексина V (Caltag-Medsystems Ltd., Buckingham, UK) в соответствии с инструкциями производителя.Сбор и анализ данных проводились на цитометре FACSort (FAC-SCA, New York, NY). Минимум 2,5 × 10 5 событий клеток было получено для каждой группы в процессе анализа, и каждый эксперимент повторяли не менее 3 раз.

2.4 Вестерн-блоттинг

И контрольные, и обработанные 6-гингеролом DPC собирали через 48 часов после обработки. Готовили полные клеточные лизаты и 30 мкг белка подвергали электрофорезу в додецилсульфате натрия / полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с последующим иммуноблот-анализом.Первичные антитела инкубировали при соответствующих разведениях: моноклональное антитело против Bcl-2, 1: 500; моноклональное антитело против Bax, 1: 500; и моноклональное антитело против GAPDH, 1: 1000 (Santa Cruz Biotechnology Inc., Санта-Крус, Калифорния). Иммунные комплексы детектировали с использованием набора для вестерн-блоттинга с усиленной хемилюминесценцией (ECL) (Santa Cruz) и количественно определяли с использованием программного обеспечения для денситометрии аналитик / ПК (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA).

2.5 Анализ 6-гингерола in vivo

Всего 36 самок мышей C57BL / 6 (возраст 8 недель) были приобретены в Центре экспериментальных животных Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай) и случайным образом разделены на 3 группы (12 /группа).Анаген был индуцирован депиляцией кожи на спине мышей C57BL / 6, которые находились в фазе телогена цикла, как описано [19]. Вкратце, волосы удаляли путем местного применения тиогликолата кальция. Со следующего дня (день 1) 0,2 мл 0,1 мг / мл или 1 мг / мл 6-гингерола в 75% (об. / Об.) Этаноле наносили на кожу спины каждого животного каждый день в течение 10 дней. Контрольные животные получали только раствор носителя. Каждые 5 дней после депиляции за спиной каждой мыши наблюдали и фотографировали.Все эксперименты длились 20 дней, после чего мышей умерщвляли. Гистологию образцов кожи, взятых со спины каждой мыши, исследовали с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (H&E). Все экспериментальные манипуляции проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Национальных институтов здравоохранения и с одобрения Комитета по этике экспериментальных животных Южного медицинского университета.

2.6 Статистический анализ

Все данные выражены как среднее ± стандартное отклонение от трех независимых экспериментов.Весь статистический анализ проводился с помощью SPSS 13.0. Различия между экспериментальными группами оценивали с помощью теста Стьюдента t . Статистически значимая разница была установлена ​​на уровне P <0,05.

Результаты

3.1 6-гингерол значительно подавляет рост DPC и индуцирует апоптоз клеток

Чтобы изучить влияние 6-гингерола на пролиферацию DPC, мы обрабатывали DPC ДМСО (контроль) или 6-гингеролом (5 или 10 мкг / мл). В течение 48 часов культивирования 6-гингерол проявлял значительный дозозависимый ингибирующий эффект на DPC ().Чтобы определить механизмы, лежащие в основе роста ингибированных 6-гингеролом DPC, влияние 6-гингерола на апоптоз клеток оценивали путем окрашивания флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) и аннексином V. Соответственно, воздействие 6-гингерола на DPC значительно увеличивало апоптоз клеток. по сравнению с контрольной группой, что позволяет предположить, что апоптоз является механизмом, лежащим в основе цитотоксичности, вызванной 6-гингеролом ().

Ингибирование роста и индукция эффектов апоптоза 6-гингерола на человеческие DPC. in vitro.

DPC культивировали с различными концентрациями 6-гингерола в течение 48 часов. По сравнению с контролем, обработанным носителем, обработка 10 мкг / мл 6-гингерола значительно ингибировала пролиферацию клеток. (А) Жизнеспособность клеток определяли с помощью анализа МТТ. * P <0,05 по сравнению с контролем, обработанным носителем. (B) Анализ клеток на апоптоз.

3.2 Влияние лечения 6-гингеролом на регуляторные белки апоптоза

Ранее было показано, что 6-гингерол вызывает апоптоз через путь гибели митохондрий [20] - [22].Поскольку известно, что этот путь апоптоза регулируется балансом анти- и проапоптотических белков семейства Bcl-2 [23], [24], мы исследовали уровень экспрессии двух ключевых белков семейства Bcl-2 Bcl. -2 и Bax в ответ на обработку DPC 6-гингеролом. Исследования иммуноблоттинга показывают, что 6-гингерол индуцировал значительное подавление антиапоптотического белка Bcl-2 и повышение проапоптотического белка Bax по сравнению с контролем, обработанным носителем. Кроме того, уровень белка Bax был повышен дозозависимым образом от 6-гингерола ( P <0.05) ().

Влияние 6-гингерола на экспрессию белков Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC.

(A) DPC обрабатывали указанными концентрациями 6-гингерола (0,1% ДМСО контроль) в течение 48 часов и подвергали вестерн-блоттингу. Показаны репрезентативные полосы. (B) Гистограммы, показывающие количественную оценку полос вестерн-блоттинга. GAPDH использовался в качестве внутреннего контроля. * P <0,05 по сравнению с контрольной (0,1% ДМСО) группой.

3,3 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса в культивируемых волосяных фолликулах человека

Поскольку DP играет ключевую роль в регуляции роста волос, мы исследовали влияние 6-гингерола на удлинение стержня волоса.Волосяные фолликулы кожи головы человека выделяли и культивировали как в отсутствие, так и в присутствии 6-гингерола. Мы наблюдали, что 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляют удлинение стержней волос (и).

Ингибирующий эффект 6-гингерола на удлинение стержней волос человека in vitro.

Волосяные фолликулы обрабатывали 6-гингеролом в различных концентрациях в течение 7 дней, а удлинение стержней человеческих волос измеряли с помощью калиброванной сетки окуляра в световом микроскопе при увеличении 20 ×.(n = 60)

Таблица 1

Удлинение стержней волос при указанной обработке (n = 60).

-Гингерол (20 мкг / мл)
Лечение Длина стержня волоса (мм) * п.
Контроль (0,1% (об. / Об.) ДМСО) 1,48 ± 0,20
6-гингерол (10 мкг / мл) 1,41 ± 0,23 0,11 0,11 1.06 ± 0,21 0,00

3,4 6-гингерол задерживает индукцию анагена из телогена у мышей

Приведенные выше результаты показывают только влияние 6-гингерола на культивированные DPC и волосяные фолликулы in vitro , что не так же, как и ситуация на месте. Чтобы преодолеть это ограничение, мы оценили роль 6-гингерола в росте волос in vivo с использованием мышей C57BL / 6 в возрасте 8 недель. Когда волосяные фолликулы дорсальной шерсти находились в фазе телогена, мышей брили на спине и выбирали тех, у которых была однородная кожа на стадии телогена.Кожу спины обрабатывали только носителем (контроль) или 6-гингеролом каждый день в течение 10 дней. показывает возобновление роста волос с 5-дневными интервалами для контроля и для лечения 6-гингеролом (например, 1 мг / мл 6-гингерола). У нормальных контрольных мышей наблюдали слабый рост волос через 10 дней после депиляции. Стало очевидно, что шерсть у мышей полностью отросла до исходного состояния в течение ~ 20 дней. После местного применения 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл, слабый рост волос наблюдался через 15 дней после депиляции, а редкий рост волос наблюдался через 20 дней после депиляции.Влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов дополнительно оценивали путем окрашивания H&E. Соответственно, местное применение 6-гингерола может значительно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой ().

Ингибирование индукции анагена телогена 6-гингеролом у мышей C57BL / 6.

После депиляции кожу спины обрабатывали носителем (справа) или 6-гингеролом в концентрации 1 мг / мл (слева) каждый день в течение 10 дней. Фотографии каждого животного делались каждые 5 дней.По сравнению с контролем, обработанным носителем, 6-гингерол в дозе 1 мг / мл может значительно ингибировать индукцию анагена телогеном. (A) нулевой день, (B) 5 дней, (C) 10 дней, (D) 15 дней и (E) 20 дней после депиляции. (F) Увеличенная фотография левой мыши в (E).

6-Гингерол уменьшал количество волосяных фолликулов у мышей C57 / BL6.

После депиляции спины кожу обрабатывали только носителем (контроль) или 1 мг / мл 6-гингерола каждый день в течение 10 дней. Действие 6-гингерола на волосяные фолликулы анализировали с помощью окрашивания H&E через 20 дней после депиляции.(а) - (в) Продольные срезы спинной кожи. (б) - (г) Поперечные срезы спинной кожи. Каждая шкала соответствует 200 мкм.

Обсуждение

Имбирь ( Z. officinale ) традиционно использовался в Восточной Азии для предотвращения выпадения волос и стимуляции роста волос. В настоящее время несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт имбиря, и заявляют, что он обладает эффектом против выпадения и роста волос [9], [10]; однако нет убедительных доказательств, подтверждающих заявленное влияние имбиря на рост волос.В этом исследовании было обнаружено, что 6-гингерол, основной активный компонент имбиря, значительно подавляет рост волос как in vitro , так и in vivo . Насколько нам известно, настоящее исследование является первым, в котором оценивается влияние 6-гингерола на рост волос. Наши результаты показывают, что 6-гингерол не способствует росту волос и может подавлять рост волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (уменьшая соотношение Bcl-2 / Bax).

Мы обнаружили, что 6-гингерол в диапазоне концентраций 5–10 мкг / мл вызывает значительное дозозависимое ингибирование пролиферации человеческих DPC ex vivo.Более того, 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляли удлинение стержня волоса (1,06 ± 0,21 мм) по сравнению с контрольной группой (1,48 ± 0,20 мм).

Было показано, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в основном за счет стимуляции митохондриального (внутреннего) пути гибели [20] - [22], который регулируется в основном белками семейства Bcl-2, в частности проапоптотическим Bax и антиапоптотическим Белки Bcl-2 [23], [24]. Принято считать, что Bcl-2 защищает клетки от апоптоза и что активность Bcl-2 определяется взаимодействием с Bax [25].Интересно, что Bcl-2 и Bax, как было показано, регулируют апоптоз волосяных фолликулов во время фазы регрессии цикла волос, вызванной апоптозом (катаген) [26], [27]. Эти данные привели к гипотезе о том, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в клетках волосяных фолликулов, регулируя уровни Bcl-2 и Bax. В этом исследовании мы показали, что 6-гингерол влияет на экспрессию Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC. Мы обнаружили, что 6-гингерол увеличивает Bax и снижает экспрессию Bcl-2 в культивируемых DPC. Обработка 6-гингеролом в течение 48 часов индуцировала значительное увеличение экспрессии Bax и снижение экспрессии Bcl-2 по сравнению с контрольной группой.Кроме того, белок Bax был активирован в зависимости от дозы 6-гингерола. На основании результатов этого и более ранних исследований [4], [12], [13], [26], [27] мы предполагаем, что 6-гингерол вызывает апоптоз в DPC, снижая уровень Bcl-2 и повышение уровня Bax.

Мы подтвердили, что 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса ex vivo, вызывая апоптотическое повреждение в DPC, но неясно, может ли 6-гингерол проникать в волосяные фолликулы и вызывать апоптотическое повреждение в DPC in vivo .По сравнению с ситуацией ex vivo, DPC в волосяных фолликулах in situ обладают более высокой устойчивостью к факторам повреждения [28]; Таким образом, чтобы определить, произошли ли наблюдаемые ex vivo изменения in vivo , мы исследовали ингибирующую рост волос активность 6-гингерола на 8-недельных мышах C57BL / 6 в стабильной и последовательной фазе телогена [19]. На выбритую кожу спины мышей C57BL / 6 ежедневно наносили местно 6-гингерол в течение 10 дней. У нормальных контрольных мышей слабый рост волос наблюдался через 10 дней, а полный рост наблюдался через 20 дней после депиляции.Однако в группе, получавшей 1 мг / мл 6-гингерола, через 15 дней наблюдалось только слабое отрастание волос, а через 20 дней после депиляции - редкое отрастание. Для дальнейшего изучения ингибирования роста волос мы оценили влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов путем окрашивания (H&E). Соответственно, местное применение 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл может существенно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой. Таким образом, было подтверждено, что первоначально наблюдаемые события in vitro фактически произошли in vivo .

Нежелательные волосы на теле могут быть эмоционально и социально разрушительными [29], что требует поиска различных методов лечения. Самый простой и популярный метод - это использование средств для депиляции, которые химически удаляют волосы с поверхности кожи, растворяя кератин, но имеют только временный эффект. К сожалению, есть некоторые побочные эффекты, такие как кожная аллергия, парадоксальный гипертрихоз или ожог кожи [30]. Согласно результатам настоящего исследования, 6-гингерол может снижать плотность волосяных фолликулов, вызывая апоптотические эффекты на DPC, и является потенциальным лекарством для стойкого удаления волос.

Таким образом, мы впервые сообщаем, что 6-гингерол не влияет на стимуляцию роста волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического действия на DPC in vitro и вызывать пролонгирование фазы телогена in vivo . Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос. Недостатки этого исследования заключаются в том, что в нем было немного меньше случаев, неизвестный эффект 6-гингерола на фолликулярные эпителиальные клетки и генетические изменения 6-гингерола на клетки сосочков дермы in vivo .Поэтому в будущих экспериментах, помимо увеличения размера выборки, мы должны проводить дальнейшие эксперименты для решения вышеупомянутых проблем.

Благодарности

Авторы благодарят Shengqi Wang, Boxin Zhao, Jindou Jiang, Zhehua Li и Zhidan Zhang за их техническую поддержку и критические обсуждения.

Отчет о финансировании

Эта работа была поддержана Китайским фондом естественных наук (грант № 31170949). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Список литературы

1. Cash TF (1999) Психосоциальные последствия андрогенетической алопеции: обзор исследовательской литературы. Br J Dermatol 141: 398–405. [PubMed] [Google Scholar] 2. Schmidt S, Fischer TW, Chren MM, Strauss BM, Elsner P (2001) Стратегии совладания и качества жизни у женщин с алопецией. Br J Dermatol 144: 1038–1043. [PubMed] [Google Scholar] 4. Квон О.С., Хан Дж. Х., Ю Х. Г., Чунг Дж. Х., Чо К. Х. и др. (2007) Увеличение роста человеческих волос in vitro с помощью эпигаллокатехин-3-галлата зеленого чая (EGCG).Фитомедицина 14: 551–555. [PubMed] [Google Scholar] 5. Kawano M, Han J, Kchouk ME, Isoda H (2009) Регулирование роста волос с помощью экстракта ароматического растения Erica multiflora. J Nat Med 63: 335–339. [PubMed] [Google Scholar] 6. Датта К., Сингх А.Т., Мукерджи А., Бхат Б., Рамеш Б. и др. (2009) Экстракт Eclipta alba, способствующий росту волос. J Этнофармакол 124: 450–456. [PubMed] [Google Scholar] 7. Ким С.К., Кан Джи, Ким М.К., Хён Дж. Х., Бу Х. Дж. И др. (2010) Стимулирующий эффект норгалантамина, компонента Crinum asiaticum, на рост волос.Eur J Dermatol 20: 42–48. [PubMed] [Google Scholar] 8. Park HJ, Zhang N, Park DK (2011) Местное применение экстракта Polygonum multiflorum индуцирует рост волос в покоящихся волосяных фолликулах за счет усиления экспрессии Shh и β-катенина у мышей C57BL / 6. J Этнофармакол 135: 369–375. [PubMed] [Google Scholar] 11. Cotsarelis G, Paus R (1999) Биология волосяных фолликулов. N Engl J Med 341: 491–497. [PubMed] [Google Scholar] 12. Хан Дж. Х., Квон О. С., Чунг Дж. Х., Чо К. Х., Ын Х. С. и др. (2004) Влияние миноксидила на пролиферацию и апоптоз клеток дермального сосочка волосяного фолликула человека.J Dermatol Sci 34: 91–98. [PubMed] [Google Scholar] 13. Луанпитпонг С., Нимманнит У., Чанворачот П., Леонард С.С., Понграхананон В. и др. (2011) Гидроксильный радикал опосредует индуцированный цисплатином апоптоз в клетках дермального сосочка волосяного фолликула человека и кератиноцитах посредством Bcl-2-зависимого механизма. Апоптоз 16: 769–782. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Али Б.Х., Блунден Г., Танира М.О., Неммар А. (2008) Некоторые фитохимические, фармакологические и токсикологические свойства имбиря (Zingiber officinale Roscoe): обзор недавних исследований.Food Chem Toxicol 46: 409–420. [PubMed] [Google Scholar] 15. Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM, D'Souza JJ, Pallaty PL, et al. (2011) Обновленная информация о химиопрофилактических эффектах имбиря и его фитохимических веществ. Crit Rev Food Sci Nutr 51: 499–523. [PubMed] [Google Scholar] 16. Филпотт М.П., ​​Грин М.Р., Кили Т. (1990) Рост человеческих волос in vitro. Cell Sci 97: 471–476. [PubMed] [Google Scholar] 17. Magerl M, Kauser S, Paus R, Tobin DJ (2002) Простой и быстрый метод выделения и культивирования фолликулярных сосочков из волосяных фолликулов кожи головы человека.Exp Дерматол 11: 381–385. [PubMed] [Google Scholar] 18. Мосманн Т. (1983) Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализов пролиферации и цитотоксичности. J Immunol методы 65: 55–63. [PubMed] [Google Scholar] 19. Müller-Röver S, Handjiski B, Eichmüller S, Foitzik K, McKay IA и др. (2001) Исчерпывающее руководство для точной классификации волосяных фолликулов мыши на разных стадиях цикла роста волос. J Invest Dermatol 117: 3–15. [PubMed] [Google Scholar] 20. Shukla Y, Prasad S, Tripathi C, Singh M, George J (2007) Модуляция in vitro и in vivo тестостерон-опосредованных изменений белков, связанных с апоптозом, с помощью [6] -гингерола.Мол Нутр Фуд Рес 51: 1492–1502. [PubMed] [Google Scholar] 21. Нигам Н., Джордж Дж., Шривастава С., Рой П., Бхуи К. и др. (2010) Индукция апоптоза [6] -гингеролом, связанная с модуляцией p53 и участием митохондриального сигнального пути в B [a] P-индуцированном онкогенезе кожи мышей. Рак Chemother Pharmacol 65: 687–696. [PubMed] [Google Scholar] 22. Lee C, Park GH, Kim CY, Jang JH (2011) [6] -Гингерол ослабляет вызванную β-амилоидом окислительную гибель клеток за счет усиления клеточной системы антиоксидантной защиты.Food Chem Toxicol 49: 1261–1269. [PubMed] [Google Scholar] 23. Mignotte B, Vayssiere JL (1998) Митохондрии и апоптоз. Eur J Biochem 252: 1–15. [PubMed] [Google Scholar] 24. Tsujimoto Y (1998) Роль белков семейства Bcl-2 в апоптозе: апоптосомы или митохондрии. Гены Клетки 3: 697–707. [PubMed] [Google Scholar] 25. Адамс Дж. М., Кори С. (1998) Семейство белков Bcl-2: арбитры выживания клеток. Наука 281: 1322–1326. [PubMed] [Google Scholar] 26. Мюллер-Ровер С., Росситер Х., Линднер Г., Петерс Э.М.Дж., Куппер Т.С. и др.(1999) Апоптоз волосяного фолликула и Bcl-2. J Investigate Dermatol Symp Proc 4: 272–277. [PubMed] [Google Scholar] 27. Бочкарева Н.В., Ахлувалия Г., Шандер Д. (2006) Апоптоз в волосяном фолликуле. J Invest Dermatol 126: 258–264. [PubMed] [Google Scholar] 28. Линднер Г., Бочкарев В.А., Бочкарева Н.В., Линг Г., Ван дер Вин С и др. (1997) Анализ апоптоза при регрессии волосяного фолликула (катаген). Am J Pathol 151: 1601–1617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Блюм-Пейтави У (2011) Обзор нежелательных женских волос.Br J Dermatol 165: 19–23. [PubMed] [Google Scholar] 30. Зумарас Дж., Квей Дж. С., Вандерворд Дж. (2008) Обзор случая пациентов с ожогами от эпиляции воском в период с января по ноябрь 2006 г., поступивших в больницу Royal North Shore. 34: 254–256. [PubMed] [Google Scholar]

6-Гингерол подавляет рост стержня волос в культивируемых фолликулах волос человека и модулирует рост волос у мышей

PLoS One. 2013; 8 (2): e57226.

, 1 , 2 , 3 , 1 , 1 , 1 и 1 , *

Юн Мяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ябин Сан

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Вэньцзюнь Ван

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Benjun Du

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Шун-э Сяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ицзюэ Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Чжици Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Майкл Хэмблин, редактор

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

MGH, MMS, Соединенные Штаты Америки,

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Задумал и спроектировал эксперименты: ZH YM. Проведены эксперименты: YM YS SX. Проанализированы данные: WW BD. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: YH YS. Написал статью: Ю.М.

Поступила 28 июля 2012 г .; Принято 18 января 2013 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используется для сдерживания выпадения и стимуляции роста волос в Восточной Азии. Несколько компаний производят шампунь, содержащий экстракт имбиря, который, как утверждается, обладает свойствами против выпадения и стимулирования роста волос. Однако нет никаких научных доказательств, подтверждающих эти утверждения. Это исследование было предпринято для измерения 6-гингерола, основного активного компонента имбиря, на удлинение стержня волоса in vitro и рост волос in vivo , а также для изучения его влияния на клетки дермального сосочка человека (DPC) in vivo и in vitro. 6-Гингерол подавлял рост волос в волосяных фолликулах в культуре и пролиферацию культивированных DPC. Ингибирование роста DPC 6-гингеролом in vitro может отражать снижение отношения Bcl-2 / Bax. Аналогичные результаты были получены in vivo . Результаты этого исследования показали, что 6-гингерол не обладает способностью стимулировать рост волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического воздействия на DPC in vitro и может вызывать удлинение телогена. фаза in vivo .Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос.

Введение

Волосы - это защитный придаток на теле, который считается вспомогательной структурой покровов. Хотя нарушение и потеря волосяных фолликулов и изменения в производстве волосяных волокон у людей, как правило, не опасны для жизни, их глубокое влияние на социальные взаимодействия и психологическое благополучие пациентов неоспоримо [1], [2] что, в свою очередь, увеличивает требования к возможным вариантам лечения и превращает средства для лечения выпадения волос в индустрию с многомиллионным оборотом.Несмотря на это, большинство современных продуктов неэффективны, о чем свидетельствует тот факт, что FDA одобрило только два метода лечения выпадения волос [3]. Учитывая ограниченную, временную и несколько непредсказуемую эффективность одобренных в настоящее время лекарств от выпадения волос [3], необходимы новые фармакологические методы лечения и средства. Было много попыток найти материалы из традиционных лекарственных трав, которые предотвращают выпадение волос [4] - [8]. Например, зеленый чай, клубнеплодный цветок ( Polygonum multiflorum Thunb) и имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используются в Восточной Азии для лечения пациентов, страдающих облысением и выпадением волос.Несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт P. multiflorum или экстракты имбиря, которые, как утверждается, обладают свойствами против выпадения и стимулирования роста волос [9], [10]. Недавно несколько исследований показали, что зеленый чай [4] или экстракт P. multiflorum [8] могут способствовать росту волос; тем не менее, нет никаких научных доказательств, подтверждающих это утверждение об имбире.

Волосяной фолликул млекопитающих содержит дермальный сосочек (DP), который в основном состоит из DP-клеток (DPC), и дермальную оболочку, происходящую из мезенхимы, а также эпителиальные клетки наружной корневой оболочки, внутренней корневой оболочки, матрицы и стержня волоса происходит из эпителия [11].Постнатальный волосяной фолликул проходит цикл анагена (фаза роста), катагена (фаза регресса) и телогена (фаза покоя). Взаимные взаимодействия между эпителием и мезенхимой важны для послеродового роста волос и цикличности волосяных фолликулов. DP, как известно, играет ключевую роль в регуляции роста волос и цикличности [11]. Таким образом, любой фактор, который влияет на функции DPC, может влиять на рост волос. Например, миноксидил [12] и эпигаллокатехин-3-галлат [4] стимулируют рост волос, оказывая свое антиапоптотическое действие на DPC (за счет увеличения соотношения Bcl-2 / Bax), это один из механизмов воздействия на Миноксидил.С другой стороны, цисплатин [13] приводит к выпадению волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (за счет уменьшения отношения Bcl-2 / Bax).

В последнее время было проведено несколько научных исследований, направленных на выделение и идентификацию активных компонентов имбиря, а также на научную проверку его фармакологического действия и действия его составляющих [14], [15]. Результаты показывают, что 6-гингерол является наиболее распространенным активным компонентом и обладает различными фармакологическими и микробиологическими эффектами, включая противоопухолевое, противовоспалительное, антиоксидантное и противорвотное действие; Однако фармакологические эффекты 6-гингерола на рост волос научно не доказаны.

В этом исследовании мы исследовали эффекты 6-гингерола на человеческие DPC и рост волосяного стержня ex vivo и рост волос у мышей.

Материалы и методы

2.1. Выделение и культивирование волосяных фолликулов человека

Образцы пункционной биопсии (4 мм) были взяты с неболедых затылочных костей головы пациентов, перенесших операцию по трансплантации волос по поводу андрогенной алопеции. Медицинский этический комитет Южного медицинского университета одобрил все исследования, описанные здесь.Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией принципов, и от всех пациентов было получено информированное письменное согласие. Волосяные фолликулы выделяли и культивировали, как описано Philpott et al [16]. Вкратце, волосяные фолликулы выделяли щипцами под бинокулярным световым микроскопом и культивировали в 24-луночных чашках в течение 7 дней в среде Williams E (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) с добавлением 10 нг / мл гидрокортизона, 10 мг / мл инсулина 2. мМ L-глутамин, 100 Ед / мл стрептомицина и 10 нг / мл гидрокортизона при 37 ° C в атмосфере 5% (об. / об.) CO 2 .6-Гингерол (чистота> 95%; Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО; Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай) и для сохранения конечной концентрации носителя < 0,1%. 6-Гингерол добавляли в культуральную среду в концентрации 10 или 20 мкг / мл, и 0,1% (об. / Об.) ДМСО использовали в качестве контроля. Во всех экспериментах культуральную среду и 6-гингерол обновляли через день. Всего 180 анагенных волосяных фолликулов от 3 разных добровольцев (60 фолликулов / субъект) культивировали при каждом условии роста.Средняя длина волосяного фолликула от дна дермальных сосочков в нулевой день составляла 4,5 мм.

2.2. Культура человеческих DPC

DPC выделяли и культивировали, как описано Magerl et al [17]. Вкратце, кожные сосочки были микродиссектированы с луковиц рассеченных волосяных фолликулов, перенесены на пластиковые чашки и культивированы в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Gibco, Grand Island, NY) с добавлением 100 Ед / мл пенициллина, 100 мг / мл стрептомицина и 20 мг / мл. % (об. / об.) фетальной бычьей сыворотки (FBS; Gibco) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 .Эксплантаты выдерживали в среде в течение 7 дней, среду меняли каждые 3 дня. Когда рост клеток становился субконфлюэнтным, клетки собирали с 0,25% (мас. / Об.) Трипсин-ЭДТА (Invitrogen, Carlsbad, CA) и субкультивировали с соотношением деления 1: 3. После этого DPC поддерживали в DMEM с добавлением 10% FBS.

2.3 Анализы пролиферации клеток и апоптоза

Пролиферацию клеток определяли с помощью анализа МТТ, как описано Мосманном [18]. Вкратце, DPC (3 × 10 4 клеток / лунку) высевали в 96-луночные планшеты и инкубировали в течение 24 часов перед добавлением 6-гингерола в концентрации 5 или 10 мкг / мл, а затем инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов, используя 0.1% ДМСО в качестве отрицательного контроля. Поглощение при 490 нм измеряли с использованием ридера для ELISA. Относительную жизнеспособность клеток рассчитывали путем деления оптической плотности обработанных клеток на оптическую плотность необработанных клеток в каждом эксперименте.

DPC, высеянные в 6-луночные планшеты с плотностью 2,5 × 10 5 клеток / лунку обрабатывали 5 или 10 мкг / мл 6-гингерола или 0,1% ДМСО в качестве контроля в течение 48 часов. Апоптоз клеток исследовали с использованием набора для обнаружения аннексина V (Caltag-Medsystems Ltd., Buckingham, UK) в соответствии с инструкциями производителя.Сбор и анализ данных проводились на цитометре FACSort (FAC-SCA, New York, NY). Минимум 2,5 × 10 5 событий клеток было получено для каждой группы в процессе анализа, и каждый эксперимент повторяли не менее 3 раз.

2.4 Вестерн-блоттинг

И контрольные, и обработанные 6-гингеролом DPC собирали через 48 часов после обработки. Готовили полные клеточные лизаты и 30 мкг белка подвергали электрофорезу в додецилсульфате натрия / полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с последующим иммуноблот-анализом.Первичные антитела инкубировали при соответствующих разведениях: моноклональное антитело против Bcl-2, 1: 500; моноклональное антитело против Bax, 1: 500; и моноклональное антитело против GAPDH, 1: 1000 (Santa Cruz Biotechnology Inc., Санта-Крус, Калифорния). Иммунные комплексы детектировали с использованием набора для вестерн-блоттинга с усиленной хемилюминесценцией (ECL) (Santa Cruz) и количественно определяли с использованием программного обеспечения для денситометрии аналитик / ПК (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA).

2.5 Анализ 6-гингерола in vivo

Всего 36 самок мышей C57BL / 6 (возраст 8 недель) были приобретены в Центре экспериментальных животных Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай) и случайным образом разделены на 3 группы (12 /группа).Анаген был индуцирован депиляцией кожи на спине мышей C57BL / 6, которые находились в фазе телогена цикла, как описано [19]. Вкратце, волосы удаляли путем местного применения тиогликолата кальция. Со следующего дня (день 1) 0,2 мл 0,1 мг / мл или 1 мг / мл 6-гингерола в 75% (об. / Об.) Этаноле наносили на кожу спины каждого животного каждый день в течение 10 дней. Контрольные животные получали только раствор носителя. Каждые 5 дней после депиляции за спиной каждой мыши наблюдали и фотографировали.Все эксперименты длились 20 дней, после чего мышей умерщвляли. Гистологию образцов кожи, взятых со спины каждой мыши, исследовали с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (H&E). Все экспериментальные манипуляции проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Национальных институтов здравоохранения и с одобрения Комитета по этике экспериментальных животных Южного медицинского университета.

2.6 Статистический анализ

Все данные выражены как среднее ± стандартное отклонение от трех независимых экспериментов.Весь статистический анализ проводился с помощью SPSS 13.0. Различия между экспериментальными группами оценивали с помощью теста Стьюдента t . Статистически значимая разница была установлена ​​на уровне P <0,05.

Результаты

3.1 6-гингерол значительно подавляет рост DPC и индуцирует апоптоз клеток

Чтобы изучить влияние 6-гингерола на пролиферацию DPC, мы обрабатывали DPC ДМСО (контроль) или 6-гингеролом (5 или 10 мкг / мл). В течение 48 часов культивирования 6-гингерол проявлял значительный дозозависимый ингибирующий эффект на DPC ().Чтобы определить механизмы, лежащие в основе роста ингибированных 6-гингеролом DPC, влияние 6-гингерола на апоптоз клеток оценивали путем окрашивания флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) и аннексином V. Соответственно, воздействие 6-гингерола на DPC значительно увеличивало апоптоз клеток. по сравнению с контрольной группой, что позволяет предположить, что апоптоз является механизмом, лежащим в основе цитотоксичности, вызванной 6-гингеролом ().

Ингибирование роста и индукция эффектов апоптоза 6-гингерола на человеческие DPC. in vitro.

DPC культивировали с различными концентрациями 6-гингерола в течение 48 часов. По сравнению с контролем, обработанным носителем, обработка 10 мкг / мл 6-гингерола значительно ингибировала пролиферацию клеток. (А) Жизнеспособность клеток определяли с помощью анализа МТТ. * P <0,05 по сравнению с контролем, обработанным носителем. (B) Анализ клеток на апоптоз.

3.2 Влияние лечения 6-гингеролом на регуляторные белки апоптоза

Ранее было показано, что 6-гингерол вызывает апоптоз через путь гибели митохондрий [20] - [22].Поскольку известно, что этот путь апоптоза регулируется балансом анти- и проапоптотических белков семейства Bcl-2 [23], [24], мы исследовали уровень экспрессии двух ключевых белков семейства Bcl-2 Bcl. -2 и Bax в ответ на обработку DPC 6-гингеролом. Исследования иммуноблоттинга показывают, что 6-гингерол индуцировал значительное подавление антиапоптотического белка Bcl-2 и повышение проапоптотического белка Bax по сравнению с контролем, обработанным носителем. Кроме того, уровень белка Bax был повышен дозозависимым образом от 6-гингерола ( P <0.05) ().

Влияние 6-гингерола на экспрессию белков Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC.

(A) DPC обрабатывали указанными концентрациями 6-гингерола (0,1% ДМСО контроль) в течение 48 часов и подвергали вестерн-блоттингу. Показаны репрезентативные полосы. (B) Гистограммы, показывающие количественную оценку полос вестерн-блоттинга. GAPDH использовался в качестве внутреннего контроля. * P <0,05 по сравнению с контрольной (0,1% ДМСО) группой.

3,3 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса в культивируемых волосяных фолликулах человека

Поскольку DP играет ключевую роль в регуляции роста волос, мы исследовали влияние 6-гингерола на удлинение стержня волоса.Волосяные фолликулы кожи головы человека выделяли и культивировали как в отсутствие, так и в присутствии 6-гингерола. Мы наблюдали, что 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляют удлинение стержней волос (и).

Ингибирующий эффект 6-гингерола на удлинение стержней волос человека in vitro.

Волосяные фолликулы обрабатывали 6-гингеролом в различных концентрациях в течение 7 дней, а удлинение стержней человеческих волос измеряли с помощью калиброванной сетки окуляра в световом микроскопе при увеличении 20 ×.(n = 60)

Таблица 1

Удлинение стержней волос при указанной обработке (n = 60).

-Гингерол (20 мкг / мл)
Лечение Длина стержня волоса (мм) * п.
Контроль (0,1% (об. / Об.) ДМСО) 1,48 ± 0,20
6-гингерол (10 мкг / мл) 1,41 ± 0,23 0,11 0,11 1.06 ± 0,21 0,00

3,4 6-гингерол задерживает индукцию анагена из телогена у мышей

Приведенные выше результаты показывают только влияние 6-гингерола на культивированные DPC и волосяные фолликулы in vitro , что не так же, как и ситуация на месте. Чтобы преодолеть это ограничение, мы оценили роль 6-гингерола в росте волос in vivo с использованием мышей C57BL / 6 в возрасте 8 недель. Когда волосяные фолликулы дорсальной шерсти находились в фазе телогена, мышей брили на спине и выбирали тех, у которых была однородная кожа на стадии телогена.Кожу спины обрабатывали только носителем (контроль) или 6-гингеролом каждый день в течение 10 дней. показывает возобновление роста волос с 5-дневными интервалами для контроля и для лечения 6-гингеролом (например, 1 мг / мл 6-гингерола). У нормальных контрольных мышей наблюдали слабый рост волос через 10 дней после депиляции. Стало очевидно, что шерсть у мышей полностью отросла до исходного состояния в течение ~ 20 дней. После местного применения 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл, слабый рост волос наблюдался через 15 дней после депиляции, а редкий рост волос наблюдался через 20 дней после депиляции.Влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов дополнительно оценивали путем окрашивания H&E. Соответственно, местное применение 6-гингерола может значительно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой ().

Ингибирование индукции анагена телогена 6-гингеролом у мышей C57BL / 6.

После депиляции кожу спины обрабатывали носителем (справа) или 6-гингеролом в концентрации 1 мг / мл (слева) каждый день в течение 10 дней. Фотографии каждого животного делались каждые 5 дней.По сравнению с контролем, обработанным носителем, 6-гингерол в дозе 1 мг / мл может значительно ингибировать индукцию анагена телогеном. (A) нулевой день, (B) 5 дней, (C) 10 дней, (D) 15 дней и (E) 20 дней после депиляции. (F) Увеличенная фотография левой мыши в (E).

6-Гингерол уменьшал количество волосяных фолликулов у мышей C57 / BL6.

После депиляции спины кожу обрабатывали только носителем (контроль) или 1 мг / мл 6-гингерола каждый день в течение 10 дней. Действие 6-гингерола на волосяные фолликулы анализировали с помощью окрашивания H&E через 20 дней после депиляции.(а) - (в) Продольные срезы спинной кожи. (б) - (г) Поперечные срезы спинной кожи. Каждая шкала соответствует 200 мкм.

Обсуждение

Имбирь ( Z. officinale ) традиционно использовался в Восточной Азии для предотвращения выпадения волос и стимуляции роста волос. В настоящее время несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт имбиря, и заявляют, что он обладает эффектом против выпадения и роста волос [9], [10]; однако нет убедительных доказательств, подтверждающих заявленное влияние имбиря на рост волос.В этом исследовании было обнаружено, что 6-гингерол, основной активный компонент имбиря, значительно подавляет рост волос как in vitro , так и in vivo . Насколько нам известно, настоящее исследование является первым, в котором оценивается влияние 6-гингерола на рост волос. Наши результаты показывают, что 6-гингерол не способствует росту волос и может подавлять рост волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (уменьшая соотношение Bcl-2 / Bax).

Мы обнаружили, что 6-гингерол в диапазоне концентраций 5–10 мкг / мл вызывает значительное дозозависимое ингибирование пролиферации человеческих DPC ex vivo.Более того, 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляли удлинение стержня волоса (1,06 ± 0,21 мм) по сравнению с контрольной группой (1,48 ± 0,20 мм).

Было показано, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в основном за счет стимуляции митохондриального (внутреннего) пути гибели [20] - [22], который регулируется в основном белками семейства Bcl-2, в частности проапоптотическим Bax и антиапоптотическим Белки Bcl-2 [23], [24]. Принято считать, что Bcl-2 защищает клетки от апоптоза и что активность Bcl-2 определяется взаимодействием с Bax [25].Интересно, что Bcl-2 и Bax, как было показано, регулируют апоптоз волосяных фолликулов во время фазы регрессии цикла волос, вызванной апоптозом (катаген) [26], [27]. Эти данные привели к гипотезе о том, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в клетках волосяных фолликулов, регулируя уровни Bcl-2 и Bax. В этом исследовании мы показали, что 6-гингерол влияет на экспрессию Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC. Мы обнаружили, что 6-гингерол увеличивает Bax и снижает экспрессию Bcl-2 в культивируемых DPC. Обработка 6-гингеролом в течение 48 часов индуцировала значительное увеличение экспрессии Bax и снижение экспрессии Bcl-2 по сравнению с контрольной группой.Кроме того, белок Bax был активирован в зависимости от дозы 6-гингерола. На основании результатов этого и более ранних исследований [4], [12], [13], [26], [27] мы предполагаем, что 6-гингерол вызывает апоптоз в DPC, снижая уровень Bcl-2 и повышение уровня Bax.

Мы подтвердили, что 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса ex vivo, вызывая апоптотическое повреждение в DPC, но неясно, может ли 6-гингерол проникать в волосяные фолликулы и вызывать апоптотическое повреждение в DPC in vivo .По сравнению с ситуацией ex vivo, DPC в волосяных фолликулах in situ обладают более высокой устойчивостью к факторам повреждения [28]; Таким образом, чтобы определить, произошли ли наблюдаемые ex vivo изменения in vivo , мы исследовали ингибирующую рост волос активность 6-гингерола на 8-недельных мышах C57BL / 6 в стабильной и последовательной фазе телогена [19]. На выбритую кожу спины мышей C57BL / 6 ежедневно наносили местно 6-гингерол в течение 10 дней. У нормальных контрольных мышей слабый рост волос наблюдался через 10 дней, а полный рост наблюдался через 20 дней после депиляции.Однако в группе, получавшей 1 мг / мл 6-гингерола, через 15 дней наблюдалось только слабое отрастание волос, а через 20 дней после депиляции - редкое отрастание. Для дальнейшего изучения ингибирования роста волос мы оценили влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов путем окрашивания (H&E). Соответственно, местное применение 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл может существенно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой. Таким образом, было подтверждено, что первоначально наблюдаемые события in vitro фактически произошли in vivo .

Нежелательные волосы на теле могут быть эмоционально и социально разрушительными [29], что требует поиска различных методов лечения. Самый простой и популярный метод - это использование средств для депиляции, которые химически удаляют волосы с поверхности кожи, растворяя кератин, но имеют только временный эффект. К сожалению, есть некоторые побочные эффекты, такие как кожная аллергия, парадоксальный гипертрихоз или ожог кожи [30]. Согласно результатам настоящего исследования, 6-гингерол может снижать плотность волосяных фолликулов, вызывая апоптотические эффекты на DPC, и является потенциальным лекарством для стойкого удаления волос.

Таким образом, мы впервые сообщаем, что 6-гингерол не влияет на стимуляцию роста волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического действия на DPC in vitro и вызывать пролонгирование фазы телогена in vivo . Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос. Недостатки этого исследования заключаются в том, что в нем было немного меньше случаев, неизвестный эффект 6-гингерола на фолликулярные эпителиальные клетки и генетические изменения 6-гингерола на клетки сосочков дермы in vivo .Поэтому в будущих экспериментах, помимо увеличения размера выборки, мы должны проводить дальнейшие эксперименты для решения вышеупомянутых проблем.

Благодарности

Авторы благодарят Shengqi Wang, Boxin Zhao, Jindou Jiang, Zhehua Li и Zhidan Zhang за их техническую поддержку и критические обсуждения.

Отчет о финансировании

Эта работа была поддержана Китайским фондом естественных наук (грант № 31170949). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Список литературы

1. Cash TF (1999) Психосоциальные последствия андрогенетической алопеции: обзор исследовательской литературы. Br J Dermatol 141: 398–405. [PubMed] [Google Scholar] 2. Schmidt S, Fischer TW, Chren MM, Strauss BM, Elsner P (2001) Стратегии совладания и качества жизни у женщин с алопецией. Br J Dermatol 144: 1038–1043. [PubMed] [Google Scholar] 4. Квон О.С., Хан Дж. Х., Ю Х. Г., Чунг Дж. Х., Чо К. Х. и др. (2007) Увеличение роста человеческих волос in vitro с помощью эпигаллокатехин-3-галлата зеленого чая (EGCG).Фитомедицина 14: 551–555. [PubMed] [Google Scholar] 5. Kawano M, Han J, Kchouk ME, Isoda H (2009) Регулирование роста волос с помощью экстракта ароматического растения Erica multiflora. J Nat Med 63: 335–339. [PubMed] [Google Scholar] 6. Датта К., Сингх А.Т., Мукерджи А., Бхат Б., Рамеш Б. и др. (2009) Экстракт Eclipta alba, способствующий росту волос. J Этнофармакол 124: 450–456. [PubMed] [Google Scholar] 7. Ким С.К., Кан Джи, Ким М.К., Хён Дж. Х., Бу Х. Дж. И др. (2010) Стимулирующий эффект норгалантамина, компонента Crinum asiaticum, на рост волос.Eur J Dermatol 20: 42–48. [PubMed] [Google Scholar] 8. Park HJ, Zhang N, Park DK (2011) Местное применение экстракта Polygonum multiflorum индуцирует рост волос в покоящихся волосяных фолликулах за счет усиления экспрессии Shh и β-катенина у мышей C57BL / 6. J Этнофармакол 135: 369–375. [PubMed] [Google Scholar] 11. Cotsarelis G, Paus R (1999) Биология волосяных фолликулов. N Engl J Med 341: 491–497. [PubMed] [Google Scholar] 12. Хан Дж. Х., Квон О. С., Чунг Дж. Х., Чо К. Х., Ын Х. С. и др. (2004) Влияние миноксидила на пролиферацию и апоптоз клеток дермального сосочка волосяного фолликула человека.J Dermatol Sci 34: 91–98. [PubMed] [Google Scholar] 13. Луанпитпонг С., Нимманнит У., Чанворачот П., Леонард С.С., Понграхананон В. и др. (2011) Гидроксильный радикал опосредует индуцированный цисплатином апоптоз в клетках дермального сосочка волосяного фолликула человека и кератиноцитах посредством Bcl-2-зависимого механизма. Апоптоз 16: 769–782. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Али Б.Х., Блунден Г., Танира М.О., Неммар А. (2008) Некоторые фитохимические, фармакологические и токсикологические свойства имбиря (Zingiber officinale Roscoe): обзор недавних исследований.Food Chem Toxicol 46: 409–420. [PubMed] [Google Scholar] 15. Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM, D'Souza JJ, Pallaty PL, et al. (2011) Обновленная информация о химиопрофилактических эффектах имбиря и его фитохимических веществ. Crit Rev Food Sci Nutr 51: 499–523. [PubMed] [Google Scholar] 16. Филпотт М.П., ​​Грин М.Р., Кили Т. (1990) Рост человеческих волос in vitro. Cell Sci 97: 471–476. [PubMed] [Google Scholar] 17. Magerl M, Kauser S, Paus R, Tobin DJ (2002) Простой и быстрый метод выделения и культивирования фолликулярных сосочков из волосяных фолликулов кожи головы человека.Exp Дерматол 11: 381–385. [PubMed] [Google Scholar] 18. Мосманн Т. (1983) Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализов пролиферации и цитотоксичности. J Immunol методы 65: 55–63. [PubMed] [Google Scholar] 19. Müller-Röver S, Handjiski B, Eichmüller S, Foitzik K, McKay IA и др. (2001) Исчерпывающее руководство для точной классификации волосяных фолликулов мыши на разных стадиях цикла роста волос. J Invest Dermatol 117: 3–15. [PubMed] [Google Scholar] 20. Shukla Y, Prasad S, Tripathi C, Singh M, George J (2007) Модуляция in vitro и in vivo тестостерон-опосредованных изменений белков, связанных с апоптозом, с помощью [6] -гингерола.Мол Нутр Фуд Рес 51: 1492–1502. [PubMed] [Google Scholar] 21. Нигам Н., Джордж Дж., Шривастава С., Рой П., Бхуи К. и др. (2010) Индукция апоптоза [6] -гингеролом, связанная с модуляцией p53 и участием митохондриального сигнального пути в B [a] P-индуцированном онкогенезе кожи мышей. Рак Chemother Pharmacol 65: 687–696. [PubMed] [Google Scholar] 22. Lee C, Park GH, Kim CY, Jang JH (2011) [6] -Гингерол ослабляет вызванную β-амилоидом окислительную гибель клеток за счет усиления клеточной системы антиоксидантной защиты.Food Chem Toxicol 49: 1261–1269. [PubMed] [Google Scholar] 23. Mignotte B, Vayssiere JL (1998) Митохондрии и апоптоз. Eur J Biochem 252: 1–15. [PubMed] [Google Scholar] 24. Tsujimoto Y (1998) Роль белков семейства Bcl-2 в апоптозе: апоптосомы или митохондрии. Гены Клетки 3: 697–707. [PubMed] [Google Scholar] 25. Адамс Дж. М., Кори С. (1998) Семейство белков Bcl-2: арбитры выживания клеток. Наука 281: 1322–1326. [PubMed] [Google Scholar] 26. Мюллер-Ровер С., Росситер Х., Линднер Г., Петерс Э.М.Дж., Куппер Т.С. и др.(1999) Апоптоз волосяного фолликула и Bcl-2. J Investigate Dermatol Symp Proc 4: 272–277. [PubMed] [Google Scholar] 27. Бочкарева Н.В., Ахлувалия Г., Шандер Д. (2006) Апоптоз в волосяном фолликуле. J Invest Dermatol 126: 258–264. [PubMed] [Google Scholar] 28. Линднер Г., Бочкарев В.А., Бочкарева Н.В., Линг Г., Ван дер Вин С и др. (1997) Анализ апоптоза при регрессии волосяного фолликула (катаген). Am J Pathol 151: 1601–1617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Блюм-Пейтави У (2011) Обзор нежелательных женских волос.Br J Dermatol 165: 19–23. [PubMed] [Google Scholar] 30. Зумарас Дж., Квей Дж. С., Вандерворд Дж. (2008) Обзор случая пациентов с ожогами от эпиляции воском в период с января по ноябрь 2006 г., поступивших в больницу Royal North Shore. 34: 254–256. [PubMed] [Google Scholar]

6-Гингерол подавляет рост стержня волос в культивируемых фолликулах волос человека и модулирует рост волос у мышей

PLoS One. 2013; 8 (2): e57226.

, 1 , 2 , 3 , 1 , 1 , 1 и 1 , *

Юн Мяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ябин Сан

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Вэньцзюнь Ван

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Benjun Du

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Шун-э Сяо

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Ицзюэ Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Чжици Ху

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

Майкл Хэмблин, редактор

1 Отделение пластической и эстетической хирургии, больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

2 Офис GCP, Больница Нанфанг, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

3 Институт исследования рака, Южный медицинский университет, Гуанчжоу, Гуандун, Китай,

MGH, MMS, Соединенные Штаты Америки,

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Задумал и спроектировал эксперименты: ZH YM. Проведены эксперименты: YM YS SX. Проанализированы данные: WW BD. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: YH YS. Написал статью: Ю.М.

Поступила 28 июля 2012 г .; Принято 18 января 2013 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего указания автора и источника.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используется для сдерживания выпадения и стимуляции роста волос в Восточной Азии. Несколько компаний производят шампунь, содержащий экстракт имбиря, который, как утверждается, обладает свойствами против выпадения и стимулирования роста волос. Однако нет никаких научных доказательств, подтверждающих эти утверждения. Это исследование было предпринято для измерения 6-гингерола, основного активного компонента имбиря, на удлинение стержня волоса in vitro и рост волос in vivo , а также для изучения его влияния на клетки дермального сосочка человека (DPC) in vivo и in vitro. 6-Гингерол подавлял рост волос в волосяных фолликулах в культуре и пролиферацию культивированных DPC. Ингибирование роста DPC 6-гингеролом in vitro может отражать снижение отношения Bcl-2 / Bax. Аналогичные результаты были получены in vivo . Результаты этого исследования показали, что 6-гингерол не обладает способностью стимулировать рост волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического воздействия на DPC in vitro и может вызывать удлинение телогена. фаза in vivo .Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос.

Введение

Волосы - это защитный придаток на теле, который считается вспомогательной структурой покровов. Хотя нарушение и потеря волосяных фолликулов и изменения в производстве волосяных волокон у людей, как правило, не опасны для жизни, их глубокое влияние на социальные взаимодействия и психологическое благополучие пациентов неоспоримо [1], [2] что, в свою очередь, увеличивает требования к возможным вариантам лечения и превращает средства для лечения выпадения волос в индустрию с многомиллионным оборотом.Несмотря на это, большинство современных продуктов неэффективны, о чем свидетельствует тот факт, что FDA одобрило только два метода лечения выпадения волос [3]. Учитывая ограниченную, временную и несколько непредсказуемую эффективность одобренных в настоящее время лекарств от выпадения волос [3], необходимы новые фармакологические методы лечения и средства. Было много попыток найти материалы из традиционных лекарственных трав, которые предотвращают выпадение волос [4] - [8]. Например, зеленый чай, клубнеплодный цветок ( Polygonum multiflorum Thunb) и имбирь ( Zingiber officinale ) традиционно используются в Восточной Азии для лечения пациентов, страдающих облысением и выпадением волос.Несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт P. multiflorum или экстракты имбиря, которые, как утверждается, обладают свойствами против выпадения и стимулирования роста волос [9], [10]. Недавно несколько исследований показали, что зеленый чай [4] или экстракт P. multiflorum [8] могут способствовать росту волос; тем не менее, нет никаких научных доказательств, подтверждающих это утверждение об имбире.

Волосяной фолликул млекопитающих содержит дермальный сосочек (DP), который в основном состоит из DP-клеток (DPC), и дермальную оболочку, происходящую из мезенхимы, а также эпителиальные клетки наружной корневой оболочки, внутренней корневой оболочки, матрицы и стержня волоса происходит из эпителия [11].Постнатальный волосяной фолликул проходит цикл анагена (фаза роста), катагена (фаза регресса) и телогена (фаза покоя). Взаимные взаимодействия между эпителием и мезенхимой важны для послеродового роста волос и цикличности волосяных фолликулов. DP, как известно, играет ключевую роль в регуляции роста волос и цикличности [11]. Таким образом, любой фактор, который влияет на функции DPC, может влиять на рост волос. Например, миноксидил [12] и эпигаллокатехин-3-галлат [4] стимулируют рост волос, оказывая свое антиапоптотическое действие на DPC (за счет увеличения соотношения Bcl-2 / Bax), это один из механизмов воздействия на Миноксидил.С другой стороны, цисплатин [13] приводит к выпадению волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (за счет уменьшения отношения Bcl-2 / Bax).

В последнее время было проведено несколько научных исследований, направленных на выделение и идентификацию активных компонентов имбиря, а также на научную проверку его фармакологического действия и действия его составляющих [14], [15]. Результаты показывают, что 6-гингерол является наиболее распространенным активным компонентом и обладает различными фармакологическими и микробиологическими эффектами, включая противоопухолевое, противовоспалительное, антиоксидантное и противорвотное действие; Однако фармакологические эффекты 6-гингерола на рост волос научно не доказаны.

В этом исследовании мы исследовали эффекты 6-гингерола на человеческие DPC и рост волосяного стержня ex vivo и рост волос у мышей.

Материалы и методы

2.1. Выделение и культивирование волосяных фолликулов человека

Образцы пункционной биопсии (4 мм) были взяты с неболедых затылочных костей головы пациентов, перенесших операцию по трансплантации волос по поводу андрогенной алопеции. Медицинский этический комитет Южного медицинского университета одобрил все исследования, описанные здесь.Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией принципов, и от всех пациентов было получено информированное письменное согласие. Волосяные фолликулы выделяли и культивировали, как описано Philpott et al [16]. Вкратце, волосяные фолликулы выделяли щипцами под бинокулярным световым микроскопом и культивировали в 24-луночных чашках в течение 7 дней в среде Williams E (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) с добавлением 10 нг / мл гидрокортизона, 10 мг / мл инсулина 2. мМ L-глутамин, 100 Ед / мл стрептомицина и 10 нг / мл гидрокортизона при 37 ° C в атмосфере 5% (об. / об.) CO 2 .6-Гингерол (чистота> 95%; Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО; Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай) и для сохранения конечной концентрации носителя < 0,1%. 6-Гингерол добавляли в культуральную среду в концентрации 10 или 20 мкг / мл, и 0,1% (об. / Об.) ДМСО использовали в качестве контроля. Во всех экспериментах культуральную среду и 6-гингерол обновляли через день. Всего 180 анагенных волосяных фолликулов от 3 разных добровольцев (60 фолликулов / субъект) культивировали при каждом условии роста.Средняя длина волосяного фолликула от дна дермальных сосочков в нулевой день составляла 4,5 мм.

2.2. Культура человеческих DPC

DPC выделяли и культивировали, как описано Magerl et al [17]. Вкратце, кожные сосочки были микродиссектированы с луковиц рассеченных волосяных фолликулов, перенесены на пластиковые чашки и культивированы в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Gibco, Grand Island, NY) с добавлением 100 Ед / мл пенициллина, 100 мг / мл стрептомицина и 20 мг / мл. % (об. / об.) фетальной бычьей сыворотки (FBS; Gibco) при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 .Эксплантаты выдерживали в среде в течение 7 дней, среду меняли каждые 3 дня. Когда рост клеток становился субконфлюэнтным, клетки собирали с 0,25% (мас. / Об.) Трипсин-ЭДТА (Invitrogen, Carlsbad, CA) и субкультивировали с соотношением деления 1: 3. После этого DPC поддерживали в DMEM с добавлением 10% FBS.

2.3 Анализы пролиферации клеток и апоптоза

Пролиферацию клеток определяли с помощью анализа МТТ, как описано Мосманном [18]. Вкратце, DPC (3 × 10 4 клеток / лунку) высевали в 96-луночные планшеты и инкубировали в течение 24 часов перед добавлением 6-гингерола в концентрации 5 или 10 мкг / мл, а затем инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов, используя 0.1% ДМСО в качестве отрицательного контроля. Поглощение при 490 нм измеряли с использованием ридера для ELISA. Относительную жизнеспособность клеток рассчитывали путем деления оптической плотности обработанных клеток на оптическую плотность необработанных клеток в каждом эксперименте.

DPC, высеянные в 6-луночные планшеты с плотностью 2,5 × 10 5 клеток / лунку обрабатывали 5 или 10 мкг / мл 6-гингерола или 0,1% ДМСО в качестве контроля в течение 48 часов. Апоптоз клеток исследовали с использованием набора для обнаружения аннексина V (Caltag-Medsystems Ltd., Buckingham, UK) в соответствии с инструкциями производителя.Сбор и анализ данных проводились на цитометре FACSort (FAC-SCA, New York, NY). Минимум 2,5 × 10 5 событий клеток было получено для каждой группы в процессе анализа, и каждый эксперимент повторяли не менее 3 раз.

2.4 Вестерн-блоттинг

И контрольные, и обработанные 6-гингеролом DPC собирали через 48 часов после обработки. Готовили полные клеточные лизаты и 30 мкг белка подвергали электрофорезу в додецилсульфате натрия / полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с последующим иммуноблот-анализом.Первичные антитела инкубировали при соответствующих разведениях: моноклональное антитело против Bcl-2, 1: 500; моноклональное антитело против Bax, 1: 500; и моноклональное антитело против GAPDH, 1: 1000 (Santa Cruz Biotechnology Inc., Санта-Крус, Калифорния). Иммунные комплексы детектировали с использованием набора для вестерн-блоттинга с усиленной хемилюминесценцией (ECL) (Santa Cruz) и количественно определяли с использованием программного обеспечения для денситометрии аналитик / ПК (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA).

2.5 Анализ 6-гингерола in vivo

Всего 36 самок мышей C57BL / 6 (возраст 8 недель) были приобретены в Центре экспериментальных животных Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай) и случайным образом разделены на 3 группы (12 /группа).Анаген был индуцирован депиляцией кожи на спине мышей C57BL / 6, которые находились в фазе телогена цикла, как описано [19]. Вкратце, волосы удаляли путем местного применения тиогликолата кальция. Со следующего дня (день 1) 0,2 мл 0,1 мг / мл или 1 мг / мл 6-гингерола в 75% (об. / Об.) Этаноле наносили на кожу спины каждого животного каждый день в течение 10 дней. Контрольные животные получали только раствор носителя. Каждые 5 дней после депиляции за спиной каждой мыши наблюдали и фотографировали.Все эксперименты длились 20 дней, после чего мышей умерщвляли. Гистологию образцов кожи, взятых со спины каждой мыши, исследовали с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (H&E). Все экспериментальные манипуляции проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Национальных институтов здравоохранения и с одобрения Комитета по этике экспериментальных животных Южного медицинского университета.

2.6 Статистический анализ

Все данные выражены как среднее ± стандартное отклонение от трех независимых экспериментов.Весь статистический анализ проводился с помощью SPSS 13.0. Различия между экспериментальными группами оценивали с помощью теста Стьюдента t . Статистически значимая разница была установлена ​​на уровне P <0,05.

Результаты

3.1 6-гингерол значительно подавляет рост DPC и индуцирует апоптоз клеток

Чтобы изучить влияние 6-гингерола на пролиферацию DPC, мы обрабатывали DPC ДМСО (контроль) или 6-гингеролом (5 или 10 мкг / мл). В течение 48 часов культивирования 6-гингерол проявлял значительный дозозависимый ингибирующий эффект на DPC ().Чтобы определить механизмы, лежащие в основе роста ингибированных 6-гингеролом DPC, влияние 6-гингерола на апоптоз клеток оценивали путем окрашивания флуоресцеинизотиоцианатом (FITC) и аннексином V. Соответственно, воздействие 6-гингерола на DPC значительно увеличивало апоптоз клеток. по сравнению с контрольной группой, что позволяет предположить, что апоптоз является механизмом, лежащим в основе цитотоксичности, вызванной 6-гингеролом ().

Ингибирование роста и индукция эффектов апоптоза 6-гингерола на человеческие DPC. in vitro.

DPC культивировали с различными концентрациями 6-гингерола в течение 48 часов. По сравнению с контролем, обработанным носителем, обработка 10 мкг / мл 6-гингерола значительно ингибировала пролиферацию клеток. (А) Жизнеспособность клеток определяли с помощью анализа МТТ. * P <0,05 по сравнению с контролем, обработанным носителем. (B) Анализ клеток на апоптоз.

3.2 Влияние лечения 6-гингеролом на регуляторные белки апоптоза

Ранее было показано, что 6-гингерол вызывает апоптоз через путь гибели митохондрий [20] - [22].Поскольку известно, что этот путь апоптоза регулируется балансом анти- и проапоптотических белков семейства Bcl-2 [23], [24], мы исследовали уровень экспрессии двух ключевых белков семейства Bcl-2 Bcl. -2 и Bax в ответ на обработку DPC 6-гингеролом. Исследования иммуноблоттинга показывают, что 6-гингерол индуцировал значительное подавление антиапоптотического белка Bcl-2 и повышение проапоптотического белка Bax по сравнению с контролем, обработанным носителем. Кроме того, уровень белка Bax был повышен дозозависимым образом от 6-гингерола ( P <0.05) ().

Влияние 6-гингерола на экспрессию белков Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC.

(A) DPC обрабатывали указанными концентрациями 6-гингерола (0,1% ДМСО контроль) в течение 48 часов и подвергали вестерн-блоттингу. Показаны репрезентативные полосы. (B) Гистограммы, показывающие количественную оценку полос вестерн-блоттинга. GAPDH использовался в качестве внутреннего контроля. * P <0,05 по сравнению с контрольной (0,1% ДМСО) группой.

3,3 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса в культивируемых волосяных фолликулах человека

Поскольку DP играет ключевую роль в регуляции роста волос, мы исследовали влияние 6-гингерола на удлинение стержня волоса.Волосяные фолликулы кожи головы человека выделяли и культивировали как в отсутствие, так и в присутствии 6-гингерола. Мы наблюдали, что 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляют удлинение стержней волос (и).

Ингибирующий эффект 6-гингерола на удлинение стержней волос человека in vitro.

Волосяные фолликулы обрабатывали 6-гингеролом в различных концентрациях в течение 7 дней, а удлинение стержней человеческих волос измеряли с помощью калиброванной сетки окуляра в световом микроскопе при увеличении 20 ×.(n = 60)

Таблица 1

Удлинение стержней волос при указанной обработке (n = 60).

-Гингерол (20 мкг / мл)
Лечение Длина стержня волоса (мм) * п.
Контроль (0,1% (об. / Об.) ДМСО) 1,48 ± 0,20
6-гингерол (10 мкг / мл) 1,41 ± 0,23 0,11 0,11 1.06 ± 0,21 0,00

3,4 6-гингерол задерживает индукцию анагена из телогена у мышей

Приведенные выше результаты показывают только влияние 6-гингерола на культивированные DPC и волосяные фолликулы in vitro , что не так же, как и ситуация на месте. Чтобы преодолеть это ограничение, мы оценили роль 6-гингерола в росте волос in vivo с использованием мышей C57BL / 6 в возрасте 8 недель. Когда волосяные фолликулы дорсальной шерсти находились в фазе телогена, мышей брили на спине и выбирали тех, у которых была однородная кожа на стадии телогена.Кожу спины обрабатывали только носителем (контроль) или 6-гингеролом каждый день в течение 10 дней. показывает возобновление роста волос с 5-дневными интервалами для контроля и для лечения 6-гингеролом (например, 1 мг / мл 6-гингерола). У нормальных контрольных мышей наблюдали слабый рост волос через 10 дней после депиляции. Стало очевидно, что шерсть у мышей полностью отросла до исходного состояния в течение ~ 20 дней. После местного применения 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл, слабый рост волос наблюдался через 15 дней после депиляции, а редкий рост волос наблюдался через 20 дней после депиляции.Влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов дополнительно оценивали путем окрашивания H&E. Соответственно, местное применение 6-гингерола может значительно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой ().

Ингибирование индукции анагена телогена 6-гингеролом у мышей C57BL / 6.

После депиляции кожу спины обрабатывали носителем (справа) или 6-гингеролом в концентрации 1 мг / мл (слева) каждый день в течение 10 дней. Фотографии каждого животного делались каждые 5 дней.По сравнению с контролем, обработанным носителем, 6-гингерол в дозе 1 мг / мл может значительно ингибировать индукцию анагена телогеном. (A) нулевой день, (B) 5 дней, (C) 10 дней, (D) 15 дней и (E) 20 дней после депиляции. (F) Увеличенная фотография левой мыши в (E).

6-Гингерол уменьшал количество волосяных фолликулов у мышей C57 / BL6.

После депиляции спины кожу обрабатывали только носителем (контроль) или 1 мг / мл 6-гингерола каждый день в течение 10 дней. Действие 6-гингерола на волосяные фолликулы анализировали с помощью окрашивания H&E через 20 дней после депиляции.(а) - (в) Продольные срезы спинной кожи. (б) - (г) Поперечные срезы спинной кожи. Каждая шкала соответствует 200 мкм.

Обсуждение

Имбирь ( Z. officinale ) традиционно использовался в Восточной Азии для предотвращения выпадения волос и стимуляции роста волос. В настоящее время несколько компаний производят шампуни, содержащие экстракт имбиря, и заявляют, что он обладает эффектом против выпадения и роста волос [9], [10]; однако нет убедительных доказательств, подтверждающих заявленное влияние имбиря на рост волос.В этом исследовании было обнаружено, что 6-гингерол, основной активный компонент имбиря, значительно подавляет рост волос как in vitro , так и in vivo . Насколько нам известно, настоящее исследование является первым, в котором оценивается влияние 6-гингерола на рост волос. Наши результаты показывают, что 6-гингерол не способствует росту волос и может подавлять рост волос, вызывая апоптотические эффекты на DPC (уменьшая соотношение Bcl-2 / Bax).

Мы обнаружили, что 6-гингерол в диапазоне концентраций 5–10 мкг / мл вызывает значительное дозозависимое ингибирование пролиферации человеческих DPC ex vivo.Более того, 20 мкг / мл 6-гингерола значительно подавляли удлинение стержня волоса (1,06 ± 0,21 мм) по сравнению с контрольной группой (1,48 ± 0,20 мм).

Было показано, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в основном за счет стимуляции митохондриального (внутреннего) пути гибели [20] - [22], который регулируется в основном белками семейства Bcl-2, в частности проапоптотическим Bax и антиапоптотическим Белки Bcl-2 [23], [24]. Принято считать, что Bcl-2 защищает клетки от апоптоза и что активность Bcl-2 определяется взаимодействием с Bax [25].Интересно, что Bcl-2 и Bax, как было показано, регулируют апоптоз волосяных фолликулов во время фазы регрессии цикла волос, вызванной апоптозом (катаген) [26], [27]. Эти данные привели к гипотезе о том, что 6-гингерол индуцирует апоптоз в клетках волосяных фолликулов, регулируя уровни Bcl-2 и Bax. В этом исследовании мы показали, что 6-гингерол влияет на экспрессию Bcl-2 и Bax в культивируемых человеческих DPC. Мы обнаружили, что 6-гингерол увеличивает Bax и снижает экспрессию Bcl-2 в культивируемых DPC. Обработка 6-гингеролом в течение 48 часов индуцировала значительное увеличение экспрессии Bax и снижение экспрессии Bcl-2 по сравнению с контрольной группой.Кроме того, белок Bax был активирован в зависимости от дозы 6-гингерола. На основании результатов этого и более ранних исследований [4], [12], [13], [26], [27] мы предполагаем, что 6-гингерол вызывает апоптоз в DPC, снижая уровень Bcl-2 и повышение уровня Bax.

Мы подтвердили, что 6-гингерол подавляет удлинение стержня волоса ex vivo, вызывая апоптотическое повреждение в DPC, но неясно, может ли 6-гингерол проникать в волосяные фолликулы и вызывать апоптотическое повреждение в DPC in vivo .По сравнению с ситуацией ex vivo, DPC в волосяных фолликулах in situ обладают более высокой устойчивостью к факторам повреждения [28]; Таким образом, чтобы определить, произошли ли наблюдаемые ex vivo изменения in vivo , мы исследовали ингибирующую рост волос активность 6-гингерола на 8-недельных мышах C57BL / 6 в стабильной и последовательной фазе телогена [19]. На выбритую кожу спины мышей C57BL / 6 ежедневно наносили местно 6-гингерол в течение 10 дней. У нормальных контрольных мышей слабый рост волос наблюдался через 10 дней, а полный рост наблюдался через 20 дней после депиляции.Однако в группе, получавшей 1 мг / мл 6-гингерола, через 15 дней наблюдалось только слабое отрастание волос, а через 20 дней после депиляции - редкое отрастание. Для дальнейшего изучения ингибирования роста волос мы оценили влияние 6-гингерола на плотность волосяных фолликулов путем окрашивания (H&E). Соответственно, местное применение 6-гингерола в концентрации 1 мг / мл может существенно уменьшить количество волосяных фолликулов по сравнению с контрольной группой. Таким образом, было подтверждено, что первоначально наблюдаемые события in vitro фактически произошли in vivo .

Нежелательные волосы на теле могут быть эмоционально и социально разрушительными [29], что требует поиска различных методов лечения. Самый простой и популярный метод - это использование средств для депиляции, которые химически удаляют волосы с поверхности кожи, растворяя кератин, но имеют только временный эффект. К сожалению, есть некоторые побочные эффекты, такие как кожная аллергия, парадоксальный гипертрихоз или ожог кожи [30]. Согласно результатам настоящего исследования, 6-гингерол может снижать плотность волосяных фолликулов, вызывая апоптотические эффекты на DPC, и является потенциальным лекарством для стойкого удаления волос.

Таким образом, мы впервые сообщаем, что 6-гингерол не влияет на стимуляцию роста волос, напротив, может подавлять рост человеческих волос за счет своего ингибирующего и проапоптотического действия на DPC in vitro и вызывать пролонгирование фазы телогена in vivo . Таким образом, 6-гингерол является скорее лекарством, не стимулирующим рост волос, а потенциальным лекарственным средством, подавляющим рост волос; т.е. для удаления волос. Недостатки этого исследования заключаются в том, что в нем было немного меньше случаев, неизвестный эффект 6-гингерола на фолликулярные эпителиальные клетки и генетические изменения 6-гингерола на клетки сосочков дермы in vivo .Поэтому в будущих экспериментах, помимо увеличения размера выборки, мы должны проводить дальнейшие эксперименты для решения вышеупомянутых проблем.

Благодарности

Авторы благодарят Shengqi Wang, Boxin Zhao, Jindou Jiang, Zhehua Li и Zhidan Zhang за их техническую поддержку и критические обсуждения.

Отчет о финансировании

Эта работа была поддержана Китайским фондом естественных наук (грант № 31170949). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Список литературы

1. Cash TF (1999) Психосоциальные последствия андрогенетической алопеции: обзор исследовательской литературы. Br J Dermatol 141: 398–405. [PubMed] [Google Scholar] 2. Schmidt S, Fischer TW, Chren MM, Strauss BM, Elsner P (2001) Стратегии совладания и качества жизни у женщин с алопецией. Br J Dermatol 144: 1038–1043. [PubMed] [Google Scholar] 4. Квон О.С., Хан Дж. Х., Ю Х. Г., Чунг Дж. Х., Чо К. Х. и др. (2007) Увеличение роста человеческих волос in vitro с помощью эпигаллокатехин-3-галлата зеленого чая (EGCG).Фитомедицина 14: 551–555. [PubMed] [Google Scholar] 5. Kawano M, Han J, Kchouk ME, Isoda H (2009) Регулирование роста волос с помощью экстракта ароматического растения Erica multiflora. J Nat Med 63: 335–339. [PubMed] [Google Scholar] 6. Датта К., Сингх А.Т., Мукерджи А., Бхат Б., Рамеш Б. и др. (2009) Экстракт Eclipta alba, способствующий росту волос. J Этнофармакол 124: 450–456. [PubMed] [Google Scholar] 7. Ким С.К., Кан Джи, Ким М.К., Хён Дж. Х., Бу Х. Дж. И др. (2010) Стимулирующий эффект норгалантамина, компонента Crinum asiaticum, на рост волос.Eur J Dermatol 20: 42–48. [PubMed] [Google Scholar] 8. Park HJ, Zhang N, Park DK (2011) Местное применение экстракта Polygonum multiflorum индуцирует рост волос в покоящихся волосяных фолликулах за счет усиления экспрессии Shh и β-катенина у мышей C57BL / 6. J Этнофармакол 135: 369–375. [PubMed] [Google Scholar] 11. Cotsarelis G, Paus R (1999) Биология волосяных фолликулов. N Engl J Med 341: 491–497. [PubMed] [Google Scholar] 12. Хан Дж. Х., Квон О. С., Чунг Дж. Х., Чо К. Х., Ын Х. С. и др. (2004) Влияние миноксидила на пролиферацию и апоптоз клеток дермального сосочка волосяного фолликула человека.J Dermatol Sci 34: 91–98. [PubMed] [Google Scholar] 13. Луанпитпонг С., Нимманнит У., Чанворачот П., Леонард С.С., Понграхананон В. и др. (2011) Гидроксильный радикал опосредует индуцированный цисплатином апоптоз в клетках дермального сосочка волосяного фолликула человека и кератиноцитах посредством Bcl-2-зависимого механизма. Апоптоз 16: 769–782. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Али Б.Х., Блунден Г., Танира М.О., Неммар А. (2008) Некоторые фитохимические, фармакологические и токсикологические свойства имбиря (Zingiber officinale Roscoe): обзор недавних исследований.Food Chem Toxicol 46: 409–420. [PubMed] [Google Scholar] 15. Baliga MS, Haniadka R, Pereira MM, D'Souza JJ, Pallaty PL, et al. (2011) Обновленная информация о химиопрофилактических эффектах имбиря и его фитохимических веществ. Crit Rev Food Sci Nutr 51: 499–523. [PubMed] [Google Scholar] 16. Филпотт М.П., ​​Грин М.Р., Кили Т. (1990) Рост человеческих волос in vitro. Cell Sci 97: 471–476. [PubMed] [Google Scholar] 17. Magerl M, Kauser S, Paus R, Tobin DJ (2002) Простой и быстрый метод выделения и культивирования фолликулярных сосочков из волосяных фолликулов кожи головы человека.Exp Дерматол 11: 381–385. [PubMed] [Google Scholar] 18. Мосманн Т. (1983) Быстрый колориметрический анализ клеточного роста и выживаемости: применение для анализов пролиферации и цитотоксичности. J Immunol методы 65: 55–63. [PubMed] [Google Scholar] 19. Müller-Röver S, Handjiski B, Eichmüller S, Foitzik K, McKay IA и др. (2001) Исчерпывающее руководство для точной классификации волосяных фолликулов мыши на разных стадиях цикла роста волос. J Invest Dermatol 117: 3–15. [PubMed] [Google Scholar] 20. Shukla Y, Prasad S, Tripathi C, Singh M, George J (2007) Модуляция in vitro и in vivo тестостерон-опосредованных изменений белков, связанных с апоптозом, с помощью [6] -гингерола.Мол Нутр Фуд Рес 51: 1492–1502. [PubMed] [Google Scholar] 21. Нигам Н., Джордж Дж., Шривастава С., Рой П., Бхуи К. и др. (2010) Индукция апоптоза [6] -гингеролом, связанная с модуляцией p53 и участием митохондриального сигнального пути в B [a] P-индуцированном онкогенезе кожи мышей. Рак Chemother Pharmacol 65: 687–696. [PubMed] [Google Scholar] 22. Lee C, Park GH, Kim CY, Jang JH (2011) [6] -Гингерол ослабляет вызванную β-амилоидом окислительную гибель клеток за счет усиления клеточной системы антиоксидантной защиты.Food Chem Toxicol 49: 1261–1269. [PubMed] [Google Scholar] 23. Mignotte B, Vayssiere JL (1998) Митохондрии и апоптоз. Eur J Biochem 252: 1–15. [PubMed] [Google Scholar] 24. Tsujimoto Y (1998) Роль белков семейства Bcl-2 в апоптозе: апоптосомы или митохондрии. Гены Клетки 3: 697–707. [PubMed] [Google Scholar] 25. Адамс Дж. М., Кори С. (1998) Семейство белков Bcl-2: арбитры выживания клеток. Наука 281: 1322–1326. [PubMed] [Google Scholar] 26. Мюллер-Ровер С., Росситер Х., Линднер Г., Петерс Э.М.Дж., Куппер Т.С. и др.(1999) Апоптоз волосяного фолликула и Bcl-2. J Investigate Dermatol Symp Proc 4: 272–277. [PubMed] [Google Scholar] 27. Бочкарева Н.В., Ахлувалия Г., Шандер Д. (2006) Апоптоз в волосяном фолликуле. J Invest Dermatol 126: 258–264. [PubMed] [Google Scholar] 28. Линднер Г., Бочкарев В.А., Бочкарева Н.В., Линг Г., Ван дер Вин С и др. (1997) Анализ апоптоза при регрессии волосяного фолликула (катаген). Am J Pathol 151: 1601–1617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Блюм-Пейтави У (2011) Обзор нежелательных женских волос.Br J Dermatol 165: 19–23. [PubMed] [Google Scholar] 30. Зумарас Дж., Квей Дж. С., Вандерворд Дж. (2008) Обзор случая пациентов с ожогами от эпиляции воском в период с января по ноябрь 2006 г., поступивших в больницу Royal North Shore. 34: 254–256. [PubMed] [Google Scholar]

Нанесите имбирь на кожу головы - Into The Gloss

Зрительный контакт с незнакомцем в метро - ужасное и одновременно вызывающее сожаление действие. Обычно обе стороны быстро переключают свое внимание на что-нибудь.Хотя, можно сделать исключение, когда другой наездник дает совет по красоте. При этом в моем списке мест, где можно получить совет о том, что свежий корень имбиря может творить чудеса, помогая возобновить рост волос, неудивительно, что MTA находится в конце моего списка.

Чтобы немного перемотать назад, позвольте мне сначала подтвердить, что, основываясь на личном опыте, стресс действительно может поразительным образом повлиять на все ваше тело, в том числе и на волосы. Если вы похожи на меня и позволите ему поглотить вас, у вас останется довольно большая прядь волос в центре головы, прямо там, где встречаются ваша средняя часть и челка.

Я стал очень осведомлен о своей потере волос после того, как мой давний стилист назвал ее «стрессовым пятном» во время сеанса окрашивания. Хотя мое эго успокаивало, что его не называли лысиной, это было катализатором в оценке вариантов, которые помогли бы ускорить процесс роста. После битвы с касторовым маслом (из-за его высокой плотности его трудно удалить с волос за одно мытье) и усталости от продуктов для роста волос, таких как Rogaine (не говоря уже о потенциальной стоимости), я потерпел поражение и оставил свои волосы на произвол судьбы. собственные устройства.

Имбирь, помимо того, что является восхитительным ингредиентом напитков (имбирное пиво, эль или какой-нибудь чай?), Является вундеркиндовой специей, которая помогает лечить множество проблем со здоровьем, таких как пищеварение, тошнота и воспаления. Учитывая вышесказанное и то, что у родственного духа из метро была полная голова без пятен, втирать имбирь в безволосый участок моей головы было действительно без риска.

«Имбирь содержит некоторые агенты кровообращения. Они помогают увеличить кровоток через кожу головы, что улучшает рост волосяных фолликулов », - объясняет Кэт Маркус, стилист и совладелец салона« Вербное воскресенье »в Торонто.«Свежий корень имбиря содержит магний, калий, фосфор и витамины, которые делают волосы более сильными, здоровыми и блестящими. Он также богат жирными кислотами, которые помогают предотвратить истончение волос ».

Итак, я трижды в неделю начал свой ритуал: отрезать кусок свежего корня длиной в дюйм, очистить его, натереть на терке и натереть на месте, а затем дать имбирю повиснуть там примерно на 30 минут, прежде чем смыть его. Ощущение покалывания действует как положительное подтверждение того, что на самом деле работает .

Примерно через месяц волосы, прорастающие на пятне, больше не являются 5-часовой тенью, а теперь достигают длины детского волоса. Можно с уверенностью сказать, что если мне посчастливится снова пересекаться с моим гуру по волосам MTA, я должен ей хотя бы имбирного пива.

- Эрин Лукас

Эрин Лукас - канадская писательница, живущая в Нью-Йорке. Она эксперт в селфи в масках, и есть вероятность, что если у нее есть ваш номер, вы, вероятно, получили его.

Фото ITG.Вы когда-нибудь слышали о шампуне с перцем чили? Он существует и утверждает, что волосы со временем растут.

Лечение выпадения волос: имбирь уменьшает воспаление кожи головы, что способствует росту волос.

Выпадение волос - это всего лишь часть жизни, с которой нам нужно просто бороться. Либо это? Постоянно проводятся новые исследования разнообразных продуктов, трав и масел, чтобы помочь в поисках чудодейственного средства, которое могло бы остановить процесс выпадения волос и способствовать их росту. Согласно аюрведической практике, имбирь может быть ответом.

Что такое имбирь?

Имбирь - это превосходная трава или специя, которая существует уже тысячи лет.

Это популярный и эффективный лекарственный ингредиент в Аюрведе. Имбирь часто называют корнем, подземным стеблем, известным как корневище.

Благодаря своему сильному и пряному аромату имбирь занимает важное место как пряность, деликатес и даже лекарство.

Используется не только в свежем виде, но и после сушки, в порошкообразном или маринованном виде, а также в виде сока и масла.

Говорят, что имбирь ускоряет рост волос.

ПОДРОБНЕЕ: Лечение выпадения волос - добавка для ускорения роста волос

Как имбирь может помочь при выпадении волос?

Имбирь улучшает кровообращение в коже головы, что приводит к притоку крови к ней.

Он также стимулирует волосяные фолликулы и способствует их росту.

Жирные кислоты имбиря полезны для тонких волос.

Человек может сделать маску для волос, натерев одну столовую ложку корня имбиря в небольшой миске и добавив в нее одну столовую ложку масла жожоба.

Рекомендуется вотрите эту пасту в кожу головы круговыми движениями и оставьте примерно на 30 минут или дольше.

Затем смойте шампунем.

Различные способы использования имбиря для увеличения роста волос

Имбирное масло

Имбирное масло выпускается в виде экстрактов или эфирных масел, последнее из которых необходимо разбавить маслом-носителем перед нанесением. Нанесите продукт на кожу головы и волосы, чтобы получить пряный, бодрящий аромат.

Смойте через 15–30 минут.

Имбирный сок

Имбирный сок производится непосредственно из корня имбиря. Вы можете отрезать край свежего корня и массировать его прямо на кожу головы.

Другой метод - измельчить корень в блендере и нанести на все волосы.

Маска для волос с имбирем

Чтобы сделать маску с имбирем для волос, вы можете использовать имбирный сок, эфирное масло или экстракт в сочетании с равными частями масла-носителя, такого как аргановое, кокосовое или жожоба.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *